检验与临床POCT实验室应用.ppt

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1、检验与临床检验及产品上海同仁医院检验科袁维祥主任检验一般了解1检验科方法简单了解2PCT3CRP4心脏标准物5总结检验科和实验室区别检验科:常规工作量大临床要求快临床检验工作最基本要求及时方便准确临床检验人员对仪器及试剂要求管用好用实用实验室:特殊项目科研为主量少检验项目:形态学定性和定量检验报告形式一浓度分析1定性2定量二形态报告1细胞2细菌3管型一按反应原理分类(定量)1用化学试剂测定方法叫化学法。如蛋白钙镁2用酶测定方法叫酶法。如葡萄糖谷丙转氨酶3用抗原抗体反应原理方法叫免疫法。HBsAg4用原子吸收方法叫色谱法。钾钠5用电泳分离方法叫电泳法。蛋白电泳高压液相色谱6测定蛋白分子用酶联聚合

2、反应即PCR方法。DNA7生物传感器。血气血糖二按方法敏感性分类1超微量法微克以下皮克纳克一般用免疫发光法激素肿瘤标志物2微量法毫克以下微克一般用金标法或胶乳法散射法RFCRP3常量法克以下毫克一般用生化法白蛋白甘油三脂根据反应产物特性分1比色常用生化测定2比浊抗原抗体测定3散射可标记乳胶4测定光强度往往标记主要反应方式1液体反应生化免疫等成本低线性宽灵敏度高2干式反应干生化免疫层析渗滤法相对灵敏度低线性窄成本高往往单人份包装标记技术分类1放射物质标记2荧光物质标记3酶物质标记4金标记(铁铜硒)5发光物标记测定方法1决定性方法2参考方法3常规方法1→2→3的过程叫正确度传递3→2→1的过程叫溯

3、源超微量分析(化学发光)目前按方法形式分类1板式发光(包被在板上)须洗涤和分离反应手续多反应慢均相发光分洗涤和无洗涤二种简单和反应快发光按反应方式:干式反应和湿反应仪器分:全自动半自动化学发光免疫化学发光分:1酶底物发光(硷性磷酸酶)贝克曼2直接发光(丫叮脂)西门子3电发光(钌)罗氏4时间分辨荧光(铕)德普5微粒荧光透景6无须分离直接发光博阳方法学要求1精密度批内批间变异系数CV%表示2正确度和目前公认结果比较偏差<5%3稳定性好4反应快5抗干扰能力强分析仪器按反应状态分类1干式反应万孚飞测金标定量2湿式反应生化仪发光仪四按反应方便程度分类1手工法2半自动3全自动仪器要求1精密度好CV<5%2

4、可靠性好3年内无故障3操作方便一看就会检验科需要可靠的产品!成功→成熟→可靠五检验科应用趋势分类简便化POCT2整个实验室全自动目前POCT技术种类1干化学血糖尿液2多层涂膜强生3免疫金标记(层析或渗滤法)各种金标HCG4生物传感器血气即时检验(POCT)目的:就地检验,结果提高医学工作效率。定义:现场即刻进行分析,快速得到结果。特点:无须专业培训可进行临床化学检测。成本:单份贵,总成本低。降低医疗费用(治疗时间缩短)理念:用最短时间、最简便而经济的技术,得到准确结果。前景:随着生物技术进步,应用领域更多(家庭、病房、监护室、食品卫生、环境保护、禁毒、法医等)每年15%递增POCT运用1运用范

5、围会越来越广医学环保食品卫生ATP技术2POCT趋势占整个检验比例会明显提高。POCT在急诊医学中运用1心肌损伤项目CKMM肌红肌钙BNP美国BIOSITE加拿大RAMP罗氏TropT2感染性疾病CRPPCT挪威Nycocard芬兰OrionDiagnostics国赛3血气及代谢物目前POCT技术种类5免疫发光标记韩国i-CHROMA6微型传感器类血气电解质7血凝类间接明胶法TPPA8乳胶类CRP9生物芯片蛋白芯片分子诊断10快速单份液体生化PCT是什么?性质:蛋白质分子量13000氨基酸116个合成:在细菌感染的诱导下,除甲状腺c细胞外,可能是肝脏巨噬细胞、单核细胞、肠及肺的内分泌细胞分泌。

6、半衰期:19-24小时浓度:正常人小于0.1ug/LPCT目前测定有方法快速检测:金标法热电公司乳胶法南京荧光法万孚德国B-H公司等免疫发光法:罗氏电发光法国梅里埃酶底物发光新产业鲁迷钠发光样本要求血浆(EDTA,肝素柠檬酸盐)或血清稳定性:室温4小时在一次内毒素刺激的人体试验中 不同的标志物的动力学变化ReinhartK,etal.CritCareClin2006;22;503-519快速、高特异性的增长在脓毒症情况下,3-6小时即可检测到其水平的增长快速衰减半衰期约20-24小时,可以快速反映治疗效果在疾病监测方面,PCT有着自然的优势!PCT的临床应用1.脓毒症:各种微生物所致感染的全身

7、炎症反应,同时伴有这些微生物或其毒素侵入血液引起疾病。败血症脓毒综合症脓毒症休克全身性炎症反应综合症(SIRS)是一种有特性临床反应。SIRS至少含有以下二种或更多标准1体温>38C或<36C2心率>90次/每分3呼吸频率>20次/每分4白细胞>12000/uL或<4000/uLSIRS主要由微生物感染所引起,其他非感染如严重缺氧,烧伤、急性胰腺炎等也可以造成。炎症诊断试验1,体温测量2,白细胞计

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