光谱与停流荧光法研究肌红蛋白及其突变体D60K与表面活性剂的相互作用.pdf

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1、物理化学学报(WuliHuaxueXuebao)JuneActaP．一Chim．Sin．，2010，26(6)：1687-16921687[Article】www．whxb．pku．edu．cn光谱与停流荧光法研究肌红蛋白及其突变体D60K与表面活性剂的相互作用李宜雯曹洪玉1,2唐乾郑学仿，2，(大连大学生物工程学院，辽宁大连116622；大连大学，辽宁省生物有机化学重点实验室，辽宁大连116622)摘要：用停流荧光法、紫外光谱法、荧光光谱法和圆二色(cD)光谱法研究了肌红蛋白(Mb)及其突变体Mb

2、(D60K)~与两种表面活性剂的相互作用．停流荧光数据表明不同浓度的十二烷基硫酸钠(SDS)和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)与Mb及Mb(D60K)相互作用均为(准)一级反应，虽然Mb(D60K)只是将肌红蛋白表面的6o位天冬氨酸突变为赖氨酸，但二者性质差异显著，说明60位氨基酸对蛋白质性质影响较大．紫外、荧光与圆二色谱的结果也表明在上述表面活性剂作用下肌红蛋白及其突变体结构与功能均发生变化，其适应性和稳定性有一定差异．综合数据分析得知，肌红蛋白突变体D60K在表面活性剂溶液中性质更加稳定．关键词

3、：表面活性剂；肌红蛋白；肌红蛋白突变体D60K；停流荧光法中图分类号：0643SpectroscopyandStopped-Flow／FluorescenceStudiesontheInteractionsofMyoglobinandItsMutant(D60K)withSurfactantsLIYi—WenCAOHong—Yu。TANGQianZHENGXue—Fang，，(1CollegeofBioengineering．Dal~nUniversity,Dalian116622,Liaoning

4、Province．P．R．China；ZLiaoningKeyLaboratoryofBioorganicChemistry,Dal~nUniversity,Dal~n116622,LiaoningProvince,PR．China)Abstract：Theinteractionsofmyoglobin(Mb1anditsmutantMb(D60K)withtwosurfactantswerestudiedusingstopped-flowfluorescencespectroscopy，ultra

5、violet-visible(LJV_Vis)absorptionspectroscopy，fluorescencespectroscopy，andcirculardichroism(CD)spectroscopy．TheMbexternalasparagine60intolysine，stopped—flowfluorescenceresultsshowedthattheinteractionsofdifferentconcentrationsofsodiumdodecylsulfate(SDS)

6、andcety1me出Ylammoniumbromide(CTAB)withMbandMb(D60K)wereallquasi—firstorderreactions．AlthoughMb(D60K)wassimplyaltered，theremarkabledifferencesobservedindicatedthataminoacid60influencestheproteinfunctiongreatly．Furthermore，resultsfromUV—Visspectroscopy．f

7、luorescencespectroscopyandCDspectroscopyallindicatedthattheconfigurationsandfunctionsofMbandMb60K1werechangedbythesurfactants．ThedataindicatesthatMbanditsmutantexhibitdifferentadaptabilitiesandstabilitiesinthesurfactantsolutions．Fromacomprehensiveandco

8、mparativedataanalysis，wedetermined山atthemutantD60Khasmorestableandadaptablefunctionalandstructuralproperties．KeyWords：Surfactant；Myoglobin；Myoglobinmutant(D60K)；Stopped—flow／fluorescence氨基酸的突变对蛋白质二级结构及其生理功能变体(D44K)增强了肌红蛋白耐热、耐酸变性能力，有着重要的