响应面法优化鹿血肽的制备工艺.pdf

《响应面法优化鹿血肽的制备工艺.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、化学工程师ChemicalEngineer2011年第11期文章编号：1002一¨24(20l1lu—oo64-o4=芏=穗筛响应面法优化鹿血肽的制备工艺：园：墟’高冷，刘达，谢冠男(长春工业大学化学与生命科学学院，吉林长春130012J摘要：采用碱性蛋白酶水解鹿血蛋白制备鹿血肽。应用响应面分析法选取温度、时间、pH值、酶量4个主要因素，以水解率为响应值，对其工艺进行了优化。得出了鹿血蛋白水解的最佳工艺条件为：温度(53％)、时间(5．5h)、pH(9．5)、酶量(1272U·g-i)，在此条件下鹿血的实际水解率为22．13

2、％。实验证明响应面法对鹿血肽的制备条件的优化是可行的，得到的工艺参数具有实际应用价值。关键词：鹿血；酶水解；响应面法中图分类号：Q503文献标识码：AResponsesurfacemethodologytooptimizethepreparationprocessdeerbloodpeptideGAOLeng，LIUDa，XIEGuan-nan(SchoolofChemistryandLifeScience，ChangchunUniversityofTechnology，Changehun130012，China)Abstr

3、act：Thedeerbloodproteinpeptidealcalasehasbeenprepairdbyalcalaseprotease．Applicationofre—sponsesurfacemethodologyselectedtemperature，time，pH，Thequanti~ofenzymefourmainfactors，thevalueofthehydrolysisrateofresponse，itstechnologyhasbeenoptimized．Optimumconditionsofprot

4、eolysisofdeerMoodobtainedtemperature(53％)，time(5．5h)，pH(9．5)，enzyme(1272U‘g)，Thedeerbloodintheactualhydroly-sisratewas(22．13％)．Experimentsshowedthattheresponsesur[acemethodofpreparationconditionsondeerbloodpeptideoptimizationisfeasible，theprocessparametershavetobeo

5、fpracticalvalue．Keyword：deerblood；enzymatichydrolysis；responsesurfacemethodology(RSM)鹿血系梅花鹿和马鹿的血液。具有提高免疫力、碱性蛋白酶(Alcalase)(Novo公司)；其它试剂均为抗疲劳等功效。鹿血中含水量为80％一81％，有机物分析纯。占16％一17％，主要是蛋白质，蛋白质含量为80％I¨。GL一21LM离心机；DK—S16电热恒温水浴锅鹿血肽是指在蛋白酶的作用下将鹿血中的蛋(上海森信实验仪器有限公司)；电子天平(梅特勒一白质水解产

6、生的多肽。多肽具有极强的活性和多样托利多仪器设备有限公司)。性，可全面调节人体生理功能，增强人体生理活性；1．2方法多肽不仅能提供人体生长发育所需的营养物质，而1．2．1鹿血肽的制备工艺采用碱性蛋白酶进行且具有特殊的生物学功能，比蛋白质更易人体吸水解，调节酶量与底物配比，同时调节溶液温度收。近年来我国对鹿血的研究仅限于原血，鹿血产50oC，pH值8．0；反应过程中不断加入1M·L『的品较单一，其中大部分是鹿血酒和鹿血粉。在欧洲NaOH，使pH值保持恒定，水解4h。待水解结束后等发达国家，他们主要利用动物血液酶解开发肽类沸水浴

7、10min使酶灭活，然后用1M·L-HC1将水解试剂和药物【2】。因此，采用酶水解鹿血蛋白对鹿血资液pH值调整为7．0，3800r·rain离心20rain，备用。源开发具有重要的意义。1．2．2水解率的测定参照甲醛滴定法，水解率的计算公式：1实验部分DH％=M(V1一V2)(1000／cwo)(1／htot)式中M：NaOH标准溶液的浓度；V。：滴定样品消耗1．1材料、试剂及仪器的0．05tool·L的NaOH标准溶液的体积，mL；V2：空鹿血(梅花鹿)(伊通吉云鹿业发展有限公司)；白试验所消耗的0．05mol·LNaOH

8、标准溶液的体积，mL；Cwo：WPC溶液的蛋白浓度，g·L；V：甲醛滴定的水解液的体积数，mL；htot：每克原料蛋白质中收稿日期：2011-10—19肽键的毫摩尔数，对于血液蛋白，该值取8．3【4．。作者简介：高冷(1963一)，男，吉林省，硕士，长春工业大学副教授主要从事天然产物研究。