土壤微生物的分离.ppt

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1、1.1掌握涂布平板法、稀释倒平板法、划线分离法分离微生物的操作技术；1.2掌握微生物样品稀释法。1.3初步掌握无菌操作技术和平板菌落计数法。实验二从土壤中分离和纯化微生物1实验目的2.1什么是微生物的纯培养,从固体培养基中分离微生物的方法有哪些?2.2为什么可以根据菌落数目来计算样品中微生物的数量?2实验原理3.1.1土壤样品：按无菌操作要求有目的地取某一类型的土壤。3.1.2培养基：牛肉膏蛋白胨培养基，高氏一号培养基，马铃薯培养基（上次实验成果）3.1.3无菌生理盐水。3.1.4其它物品：无菌培养皿，无菌吸管，洗耳球，无菌玻璃涂棒，无菌报纸，药勺，10％酚溶液。3材料与方法3.1实验

2、器材3.2方法（A.稀释涂布平板法）各管4.5mL无菌水依次0.5mL，注意更换枪尖10-4、10-5、10-6；各平板0.1mL3.2.1制备土壤稀释液振荡20min三角烧瓶中为什么要加玻璃珠?取土壤过程中怎样减少杂菌污染?3.2.2倒平板将培养基加热熔化，冷至55－60℃，(在高氏1号培养基中加入10%酚数滴)，(在马铃薯培养基中加入链霉素溶液至终浓度为30ug/mL，)混匀后倒入平板。（操作方法，教师示范）每平板12mL3.2.3涂布标记浓度取菌液0.1mL玻璃涂棒灭菌涂布静置5－10min3.2.3培养细菌霉菌放线菌28℃培养箱37℃培养箱倒置培养24-48h倒置培养3-5天3

3、.2.4平板菌落计数选取平板上长有50－200个菌落的稀释度计算每毫升的含菌量，同一稀释度的三个重复平板上菌落数应相差不大，且不同稀释度计算的数据也不应相差太大。3.2方法（B.稀释倒平板法）取样（0.1mL)倒平板（45℃，12mL，旋动)教师示范倒置培养3.2方法（C.平板划线分离法）倒平板划线（教师示范）倒置培养实验报告1用文字描述实验项目、实验目的、材料与方法.2实验结果。观察菌落数目、菌落形态特征，数据可设计表格表示。注意用三线表，要求有表格名称，项目清晰。3实验分析。比较涂布平板法和稀释倒平板法两种操作方法的结果？作为初学者更适合用什么方法？实验操作中存在什么问题，应如何改

4、进？