松果菊苷对TNFα诱导的SH2SY5Y细胞凋亡的保护作用.pdf

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1、中国药理学通报ChinesePharmacologicalBulletin2005Feb;21(2):169~74·169·松果菊苷对TNFα诱导的SH2SY5Y细胞凋亡的保护作用11221邓敏,赵金垣,屠鹏飞,姜永,陈静(1.北京大学第三医院职业病研究中心,北京100083;2.北京大学中药现代化研究中心,北京100083)[2]中国图书分类号:R282171;R28411;R329125;R7301264常重要的作用,从而把减轻氧化应激作为药物作文献标识码:A文章编号:1001-1978(2005)02-

2、0169-06用的靶点之一,用于神经保护药物的筛选。摘要目的探讨肉苁蓉提取物松果菊苷对TNFα诱导的肉苁蓉HerbaCistanches为肉苁蓉属植物干燥SH2SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法用MTT法检测细胞带鳞叶的肉质茎,具有补肾阳、益精血、润肠通便之存活率,DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡功效,主治男子阳痿、女子不孕、血枯便秘等证,有的发生,以激光共聚焦显微镜荧光染色法检测细胞内活性氧[3,4]“沙漠人参”之美誉。一系列研究表明肉苁蓉可的产生和线粒体膜电位的变化,并用荧光酶标仪测定以提高多种

3、中枢神经递质的含量,具有很强的抗氧-1caspase23的活性。结果100μg·LTNFα处理细胞36h化作用,还可延长动物寿命和抗衰老作用。苯乙醇显著降低细胞的存活率;诱导细胞发生凋亡,凋亡率达[5,6]苷类化合物被认为是肉苁蓉的主要活性成分。37%;细胞内活性氧水平及caspase23的活性升高;而线粒体管花肉苁蓉与肉苁蓉比较,不但所含的苯乙醇苷等膜电位却明显降低,红/绿荧光强度的比值由正常的5197降低为0135左右。而预先给予1,10或者100mg·L-1浓度化学成分相似,还有某些药理作用在某种程度上

4、优的松果菊苷处理细胞2h,可提高细胞存活率;并可有效抑制于肉苁蓉,因此管花肉苁蓉可作肉苁蓉使用或两者DNAladder的发生;流式细胞仪检测凋亡率分别降低到混用。松果菊苷(echinacoside)是从管花肉苁蓉2519%,1813%和812%;激光共聚焦显微镜结果显示松果(Cistanchetubulosa)中分离、纯化的一种苯乙醇苷类[7]菊苷可明显抑制细胞内活性氧产生;并可逐渐恢复线粒体的化合物(Fig1),为探讨该成分是否可以抑制神经高能量状态;caspase23的活性不断降低,并呈现了一定的剂退行性

5、疾病的氧化应激反应,拮抗神经细胞的凋亡,量依赖性。结论松果菊苷能抑制TNFα诱导的SH2SY5Y本文以肿瘤坏死因子alpha(TNFα)诱导的细胞凋细胞凋亡,其神经细胞保护作用可能与降低细胞内活性氧水亡为模型,研究松果菊苷对培养的SH2SY5Y神经细平,抑制caspase23的活性和维持线粒体膜电位的高能状态胞的保护作用及其可能机制。有关。关键词:松果菊苷;细胞凋亡;TNFα;SH2SY5Y细胞;线粒体膜电位;活性氧;caspase23细胞凋亡是一种遗传决定的自主性程序性细胞死亡,在维持体内细胞稳态和神经系统

6、的发育过程Fig1Chemicalstructureofechinacoside中起重要作用。很多证据表明神经元的凋亡涉及癫1材料与方法痫、脑血管病和一些神经退行性疾病如阿尔采末病、1.1材料1.1.1试剂肿瘤坏死因子alpha(TNFα)、胰蛋帕金森病、肌萎缩性侧索硬化症及一氧化碳中毒迟白酶(trypsin)、42甲基偶氮唑蓝(MTT)为Sigma公发脑病等的发病机制,被认为是这些疾病中神经细[1]司产品;MEM培养基和胎牛血清为GIBCO公司产胞死亡的共同机制。近来研究发现氧化应激和品;荧光标记的钙结合蛋

7、白(AnnexinV2FITC)和碘线粒体膜电位下降在神经元的死亡过程中发挥了非化丙啶(propidumiodid,PI)为BoehringerMannheim收稿日期:2004-03-21,修回日期:2004-06-09产品;检测细胞内自由基的荧光探针2′7′-二氯荧基金项目:国家自然科学基金资助项目(No30070651)光素乙酰乙酸盐(2,72dichlorodihydrofluoresceindi2作者简介:邓敏(1974-),女,博士生,E2mail:dengmindoctor@sina.aceta

8、te,H2DCFDA)和线粒体膜电位的荧光探针com;JC1为MolecularProbes公司产品;DNA提取和赵金垣(1942-),男,教授,博士生导师,研究方向:一氧化碳中毒迟发脑病的分子机制及肉苁蓉的干预作用,Tel:caspase23检测试剂盒为Promega公司产品;松果菊01026201769122651,Fax:010262017700,E2mail:drzhao2苷由北京大学药学院

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