全血细胞计数.doc

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1、大庆油田总医院集团乘风医院检验科质量手册1.全血细胞分析（血常规）检测第1页、共13页第1版、第3次修订规程编写：戴涛日期：2006-6-2附件3：SOP文件、临检审核：王崇波日期：2011-3-301.仪器检测原理定量地吸取血液取样，按规定的倍率稀释后，被送入各检测器容器，在检测容器中，有孔眼状细孔，在其两侧的电极之间通有直流电。当浮游在稀释试样中的血球，通过细孔时，电极之间的直流电阻将发生变化。根据直流电阻的变化血球的大小作为电脉冲被检测出来。根据电脉冲的个数，可算出血球数。另外，可通过求该脉冲大小，就可按血球的大小描出粒度分布，并且，通过解读粒

2、度分布，可得到各种解读数据。1.1WBC、HGB检测原理（1）全血模式：1)血液通过吸液管被吸入旋转阀；2)由旋转阀定量的6μL的血液，用稀释液1.994ML被移送到WBC检测器的同时，添加WBC／HGB溶血剂1.0ML，成1∶500的稀释试样。这个状态下约使其反应10秒后，在白细胞膜保持原来的状态下，红细胞发生溶血，血小板收缩。同时血红蛋白变成红色的正铁化的血红蛋白。3)WBC检测器中的被稀释／溶血后的试样中，约1ML被移送到HGB检测器。4)WBC检测器中的试样，通过细孔被吸引500μL，这时，根据PC检测法，对血球通过细孔时的脉冲数进行计数。5

3、)在HGB测量器中，由发光二极管照射波长为555NM的光，能照射到HGB细胞中的试样。此试样的浓度作为吸光率的测量，与试样进入前测量的只有稀释液时的吸光率相比较，以求出HGB（血红蛋白值）。（2）稀释模式：1)事先用清洗液稀释成1∶26的血液试样，通过吸液管被吸入旋转阀。2)由旋转阀定量的78μL稀释血液，用稀释液1.922ML被送到WBC检测器的同时，添加WBC／HGB溶血剂1.0ML，成1∶1000的稀释试样。这个状态下约使其反应溶血，血小板收缩。同时血红蛋白变成红色的正铁化的血红蛋白。3）WBC检测器中的被稀释溶血后的试样中，约1ML被移送到H

4、GB检测器。4）WBC检测器中的试样，通过细孔吸引500μL，这时，根据DC检测法，对血球通过细孔时的脉冲数进行计数。5）在HGB测量器中，由发光二极管照射到HGB细胞中的试样。此试样的浓度作为吸光度被测量，与试样进入前测量的只有稀释液时的吸光度相比较，以求出HGB（血红蛋白值）。14/14大庆油田总医院集团乘风医院检验科质量手册1.全血细胞分析（血常规）检测第2页、共13页第1版、第3次修订规程编写：戴涛日期：2006-6-2附件3：SOP文件、临检审核：王崇波日期：2011-3-301.2RBC、PLT测量原理（1）全血模式：1）血液通过吸液管被

5、吸入旋转阀。2）由旋转阀定量4.0μL血液，用稀释液1.996ML稀释成1∶500，作为稀释试样被移送到搅拌容器。（第一次稀释）。3）接着，被稀释成1∶500的试样用旋转阀定量40μL，用稀释液1.960μL稀释成1∶25000，被移送到RBC/PLT检测器。（第二次稀释）4）RBC／PLT检测器中的试样，通过细孔被吸取250μL。同时，RBC及PLT由DC检测法被计数。同时，HCT（红细胞比积），由红细胞脉波峰值检测法来求出。（2）稀释模式：1）用清洗液事先稀释1∶26的血液试样，用吸液管吸入旋转阀。2）旋转阀定量2.08μL的稀释血液，用1.99

6、792ML的稀释液被移到RBC／PLT检测器，稀释成1∶25000的稀释试样。3）RBC/PLT检测器中的试样，通过细孔被吸引250μL，同时RBC及PLT根据DC检测法来计数。同时，HCT（红细胞比积值）根据红细胞脉冲波峰值检测法求出。1.3红细胞计算红细胞常数（红细胞平均体积，红细胞平均血红蛋白量，红细胞平均血红蛋白浓度）根据RBC、HGB及HCT来求出。（1）细胞平均体积（MCV）根据RBC及HCT，由下式来求出。MCV（fL）＝HCT（%）／RBC（×106／μL）×10（2）红细胞平均血红蛋白量（MCH）根据RBC及HGB，由下式来求出。M

7、CH（pg）＝HGB（g/dL）／RBC（106／μL）×10（3）胞平均血红蛋白浓度（MCHC）根据HCT及HGB，由下式来求出。MCHC（g/dL）＝HGB（g/dL）／HCT（%）×1001.4WBC的分类原理（1）WBC粒度分布，采用4条辨别线划分3个区域，来辨别小型白细胞，中型白细胞，大型白细胞，低辨别线（LD）在30至60fL之间的最合适位置上自动决定，高鉴别线（UD）固定在300fL，用作粒度分布的异常监视。进一步求出（LD）和（UD）之间的范围内的WBC粒度分布的谷值，最初的谷值设为TROUGH辨别线1（T1），另一个谷值设为TROU

8、GH辨别线2（T2）。14/14大庆油田总医院集团乘风医院检验科质量手册1.全血细胞分析（血常规）检测第3页