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1、第36讲 微生物的培养与应用【考纲解读】最新考纲细解考点核心素养1.微生物的分离和培养2.某种微生物数量的测定3.培养基对微生物的选择和利用1.说出微生物的实验室培养及无菌技术2.举例说明微生物的选择培养3.举例说明某种微生物的分离与计数1.科学思维——分析与综合:分析培养基的成分及其作用;比较与分类:平板划线法和稀释涂布平板法异同;选择培养基和鉴别培养基的区别2.科学探究——设计实验探究微生物培养的条件及如何分离某种微生物等3.社会责任——关注有害微生物的控制及宣传健康生活方式等考点一 微生物的实验室培养研析教材内
2、化基本概念1.培养基(1)概念:人们按照微生物对的不同需求,配制出供其的营养基质。(2)营养构成:一般都含有和无机盐。此外还需要满足微生物生长对、氧气以及的要求。(3)种类及实例①种类:按照物理性质可分为培养基和培养基。营养物质生长繁殖水、碳源、氮源pH特殊营养物质液体固体②实例:下表为某微生物培养基的成分KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素琼脂H2O1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g1000mL该培养基中可以为微生物提供碳源的是,因为此培养基中加入了,故该培养基为固体培养基。葡
3、萄糖琼脂2.无菌技术(1)目的:获得。(2)关键:防止的入侵。(3)无菌技术的主要方法及适用对象[连线]纯净培养物外来杂菌答案:13.大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基①操作步骤计算→1→溶化→→倒平板②倒平板的方法及注意事项a.请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程:。b.乙中的灭菌方法是。称量灭菌丙→乙→甲→丁灼烧灭菌(2)纯化大肠杆菌的方法①纯化培养原理:在培养基上得到的肉眼可见的,即可获得较纯的菌种。②纯化大肠杆菌的关键步骤:。③常用的微生物接种方法有两种。a.平板划线法:通过在琼脂固体培养基
4、表面的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。b.法:将菌液进行一系列的,然后将的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。由一个细胞繁殖而来菌落接种接种环连续划线稀释涂布平板梯度稀释不同稀释度4.菌种的保藏方法(1)临时保藏法:对于使用的菌种,先接种到试管的培养基上培养,然后放入℃的冰箱中保藏。(2)甘油管藏法:对于需要的菌种,先将菌液转入灭菌后的中,混匀后放在℃冷冻箱中保存。频繁固体斜面4长期保存甘油-20【深挖教材】请从接种操作是否符合无菌要求的角度判断接种操作是否合格?提示:若培养基上生长的菌落的颜
5、色、形状、大小基本一致,并符合接种菌菌落的特征,说明接种操作符合要求。思考探究培养科学思维1.选择无菌技术的原则是什么?提示:(1)考虑无菌技术的效果:灭菌的效果比消毒要好。(2)考虑操作对象的承受能力:活体生物材料、操作者的手等只能采用消毒,而不能灭菌。2.两种接种方法的比较。如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图,请分析接种的具体方法。(1)获得图A效果的接种方法是,图B效果的接种方法是。(2)某同学在用A方法纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是。为了防止杂菌污染,有同
6、学建议加入抗生素,你觉得可以吗?。并说明理由。提示:(1)稀释涂布平板法 平板划线法(2)菌液浓度过高(土壤溶液稀释不够) 不可以 因为抗生素不但杀灭杂菌,而且也可以杀灭土壤细菌,所以在培养基上不可以加入抗生素。归纳总结比较项目平板划线法稀释涂布平板法关键操作接种环在固体平板培养基表面连续划线①一系列的梯度稀释②涂布平板法操作注意事项每次划线前后均需灼烧接种环稀释度要足够高,为确保实验成功可以增加稀释度的范围菌体获取在具有显著的菌落特征的区域菌落中挑取菌体从适宜的稀释度的平板上的菌落中挑取菌体适用范围适用于好氧菌适用
7、于厌氧菌和兼性厌氧菌剖析题型提升核心素养题型一 考查无菌技术1.(2018·全国Ⅱ卷)在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题:(1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。解析:(1)干热灭菌是指将物品放入干热灭菌箱内,在160～170℃条件下加热1～2h。耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等,可采用干热灭菌的方法。答案:(1)可以(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这
8、两种方法的优点是。(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒,其原因是紫外线能,在照射前,适量喷洒,可强化消毒效果。解析:(2)巴氏消毒法是在70～75℃条件下煮30min或在80℃条件下煮15min,可以杀死牛奶中的微生物,并且使牛奶的营养物质损失较少。(3)接种室、接种箱或超净工作台在使用前,可以用紫外线照射30min,紫外线能破坏微生物的
