elisa一步法和两步法检测hbsag的比较

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1、福建医药杂志2013年12月第35卷第6期FujianMedJ，December2013，Vo1．35，No．6·71·Chem，2006。52‘4t{fO一n1．EJ]．检验医学，2006，21(6)：570—572．E5]李萍，刘小娟，徐克和．利用Westgard标准决定图判断测定方E83WestgardJO，WestgardSA．Thequalityoflaboratorytesting法性能EJ3．临床检验杂志，2006，24(1)：69—70．today：allassessmentofsigmametricsforanalyticqua

2、lityusingE63李园园．应用6o理论评价临床实验室检验性能及设计质控方案performancedatafromproficiencytestingsurveysandtheCLIA口]．中国医疗器械信息，2007，13(6)：9211．criteriaforacceptableperformance[J]．AmJClinPathol，ET；王治国，李少男，王薇．检验方法评价决定图的制作及应用2OO6。125(3)：343—354．·实验诊断与临床·ELISA一步法和两步法检测HBsAg的比较福建省血液中心(福州350004)林海娟林授【摘

3、要】目的比较ELISA一步法和两步法检测HBsAg的差异。方法经HBsAg中和试验确证的115份阳性样本和3O份阴性样本，采用ELISA一步法试剂和两步法试剂进行检测。通过检测结果的统计分析评价两种试剂的检测能力。结果115份阳性样本，～步法阳性检出率68．7，两步法阳性检出率76．5；30份阴性样本，一步法阴性检出率93．3，两步法阴性检出率96．7％；对等评估指标比较结果，两步法均优于一步法，其中敏感性差异有统计学意义(P％0．O1)，特异性差异无统计学意义(P>0．05)；阳性样本检测值s／co，两步法高于一步法(P

4、检测值(s／co)，两试剂检测差异无统计学意义(P>0．10)。结论ELISA两步法检测HBsAg的能力高于ELISA一步法，且能确保血液安全。【关键词1HBsAg；ELISA；两步法；一步法【中图分类号】R392—33【文献标识码】B【文章编号】lDO2—260O(2O13)06—0071—03乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)是乙型肝炎RSP150自动加样仪和Zenyth340rt酶标仪(奥地的重要血清学标志物。为保障血液安全，避免经输利Anthos)。血传播，采供血机构必须采用2个不同厂家的1．2方法：将上述样本分别使用一步法试剂和两ELI

5、SA试剂检测HBsAg或采用1种ELISA试剂检步法试剂进行检测。首先，以中和试验确证结果为测HBsAg，采用1种试剂检测HBV核酸【1]。根据参照判断依据，根据检测结果分别计算出两试剂的2010年版《中华人民共和国药典》关于血源筛查常用对等评估指标，包括敏感性、特异性、有效用HBsAg酶免疫检测试剂盒的制造要求[2]，国内性、阳性预测值、阴性预测值；其次，通过对两试多数试剂厂家已将HBsAgELISA试剂盒的检测模剂检测结果吸光度值／临界值(s／co)的统计分式试剂盒由一步法变更为两步法。为评价两种检测析，评价其检测能力是否存在差异。模式的检测

6、能力及其对血液安全性可能造成的影1．2．1一步法操作：根据试剂说明书要求，先将响，我中心对ELISA一步法和两步法检测HBsAg待测样本及阴、阳性对照血清各5OL分别加入微的效果进行了比较。孔板上相应的孔中，然后分别在每孔中加入酶标记1材料与方法抗体5OL，轻拍混匀，置37℃温育60min后，1．1材料：收集2009年6月至2010年6月福建用洗涤液充分洗涤5次后扣干，每孔加入酶底物A省血液中心ELISA检测HBsAg呈反应性的部分无和B各50L，轻拍混匀，37℃暗置15rain后加偿献血者样本145份。选择同一国产厂家生产的入终止液50L，混匀

7、后用酶标仪测定各孔OD值，HBsAgELISA一步法试剂盒和HBsAgELISA两通过与临界值(CO)进行比较得出各样本的检测步法试剂盒为评估对象，HBsAg确证试剂为美国结果。雅培公司提供的MurexHBsAgConfirmatoryVer-1．2．2两步法操作：根据试剂说明书要求，先在sion3，所用试剂盒均为国家批准检验合格，并在微孔板上每孑L加入2OL样本稀释液，再将待测样有效期内使用。仪器选择瑞士(HAMILTON)本及阴、阳性对照血清各100L分别加入相应的FAME24／30全自动酶免疫处理系统、TECAN孔中，置37℃温育60rai

8、n，然后分别在每孔中加·72·福建医药杂志2013年12月第35卷第6期FujianMedJ，December2013，Vo1．35，N