新变异的禽传染性支气管炎病毒ZJ971毒株S基因克隆及序.pdf

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1、中国农业科学 2001,34(4):445-450ScientiaAgriculturaSinica新变异的禽传染性支气管炎病毒ZJ971毒株S基因克隆及序列分析周继勇,沈行燕,程丽琴,丁红梅,吴建祥(浙江大学动物预防医学研究所,杭州 310029)摘要:从以鸡腺胃肿大为致病特征的病例中鉴定了一株新的禽传染性支气管炎病毒变异毒株(命名为传染性支气管炎病毒嗜腺胃毒株,ZJ971株),对该毒株进行RT2PCR扩增,将得到的S基因cDNA克隆入pBluescriptSK(+)质粒载体中。测序结果显示,传染

2、性支气管炎病毒嗜腺胃毒株ZJ971株S基因全长为3492nt,编码一条1080个氨基酸组成的多肽,其核苷酸与已报道IBV2Beaudette、M41、Ark99、Cut2毒株比较,同源性分别为9713%、9715%、8816%、8516%;氨基酸的同源性分别为96%、9613%、8611%、8311%。ZJ971毒株S基因第3241位的碱基由G突变为T,造成S蛋白的翻译从3492位核苷酸提前到3240位终止。关键词:鸡;传染性支气管炎病毒嗜腺胃毒株;S基因;克隆中图分类号:S858131214文献标

3、识码:A文章编号:057821752(2001)0420445206CloningandSequencesoftheEntireSGeneofaVariantInfectiousBronchitisVirusZJ971IsolatedinChinaZHOUJi2yong,SHENXing2yan,CHENGLi2qin,DINGHong2mei,WUJian2xiang(InstituteofPreventiveVeterinaryMedicine,ZhejiangUniversity,Hangzh

4、ou310029)Abstract:Anovelproventriculopathogicvariant(isolateZJ971)ofinfectiousbronchitisviruswasidentifiedfromenlargedproventriculusofthesickchickensinthestudy.TheSgenecDNAsegmentwith3.6kbinlengthwasamplifiedbyRT2PCRwithspecialprimersfromtheZJ971virals

5、trainofinfectiousbronchitisvirus(IBV)andclonedintoplasmidpBluescriptSK(+).TherecombinantscontainedSgeneofIBV2ZJ971strainwereidentifiedbydigestionofrestrictionenzymeEcoRÉ,BamHÉandPCRamplification.TheclonedSgenefromIBV2ZJ971strainwascomposedof3492bpinlen

6、gthencodingforapolypeptideof1080aminoacids.ComparedwiththatofreportedIBVstrainsBeaudette,M41,Ark99andCut2,thenucleotidehomogeneityofSgeneofIBV2ZJ971strainwas9713%,9715%,8816%and8516%,respectively;andthehomogeneityofthededucedaminoacidsofSproteinofIBV2Z

7、J971was96%,9613%,8611%and8311%respectively;Especially,themutationof3241stnucleotideofSgeneofIBV2ZJ971strainfromGtoTresultedinthetranslatingterminationofSproteinat3240thnucleotidesite.Keywords:Avian;Proventriculopathogicinfectiousbronchitisvirus;Sgene;C

8、loning  禽传染性支气管炎病毒(infectiousbronchitis白,Boursnell等1987年完成了IBV2Beaudette毒[1]virus,IBV)是冠状病毒属的代表性成员之一,其基株全核苷酸序列的测定。S蛋白在真核细胞内裂因组(约27.6kb)主要编码S、M和N3种结构蛋解生成S1糖蛋白和S2糖蛋白,S1糖蛋白能刺激机收稿日期:2000210216基金项目:国家自然科学基金(39970030),浙江省重点科研项目(991102030),浙江省

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