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《单精子分型技术构建遗传图谱的研究进展.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、国外医学遗传学分册1998年第21卷第2期13BartoshukLMetal.ChemSenses,1992;17:594ed.Olfactionandtaste.London:IRLPress,1980,36714BartoshukLMetal.ChemiSenses,1993;18:52621GentJF.ChemSenses,1983;7:26515BlakesleeAFFosAL.JHered,1932;23:9722MarinoSetal.ChemiSenses,1991,16:55116KalmusHAnnHumGenet,1958;22:22223BartoshukLMetal.
2、ChemiSenses,1995;20:66317BartoshukLMetal.ChemSenses,1993;18:52624KarrerTAetal.ChemiSenses,1992;17(5):64918KarrerTBartoshukLM.PhysiolBehav,1995;57:42125DuffyVBetal.ChemiSenses,1995;20:68819BartoshukLMetal.ChemSenses,1988;13:51726LucchinaLAetal.ChemiSenses,1995;20:73520BartoshukLMetal.Tasteofsalts,In:
3、VanderStarreH,3单精子分型技术构建遗传图谱的研究进展华中农业大学动物分子生物学与育种实验室(武汉430070)戢福云李奎赵书红彭中镇综述提要单精子分型技术在80年代末兴起,在短短的几年中,得到很大的发展。目前单精子分型技术不仅被应用于构建人类遗传图谱及法医学等领域,也被应用于牛、鼠等动物的基因连锁分析及胚胎着床前和产前的遗传性疾病分析等方面,为目前遗传学上难以解决的许多问题提供了一个独特的工具。本文就单精子分型技术的产生、特点、应用及某些进展综述如下。一、单精子分型技术的产生因型又可通过检测来源于一个双杂合子的精子DNA分子遗传标记的发展,使得在任何物中存在等位基因中的哪一个而得
4、到确定。可通种中构建遗传图谱成为可能。而构建高等生物过重组的精子数与所检精子总数的比值来估计遗传图谱的经典方法是进行系谱分析或对选择重组率。由于一个雄性个体在一生中可产生无性杂交后代进行分析。这种分析方法受到高等数的减数分裂产物—精子,从而提供了进行遗生物本身的一些条件限制。同时,利用系谱分析传分析取之不尽的实验材料。因此,这种方法为所构建的遗传图谱,其遗传标记间的距离一般目前人类及其它哺乳动物遗传学中难以解决的只能精确到1cM(1cM=1%重组率,约相当于问题提供了一个新的方法。对上述难以用系谱1000kb的DNA)。如果要分析更小的遗传距分析构建遗传图谱的物种及遗传标记含有较低离,则需要大
5、量的来自于遗传信息含量丰富的PIC(polymorphicinformationcontent,多态信家系的后代。这在实践中,有一定的困难。息含量)的物种进行单精子分型,可能就是对它应用RFLP(restrictionfragmentlength们构建遗传图谱的唯一切实可行的方法。polymorphism)在构建人类遗传图谱方面取得二、单精子分型的遗传原理及精子中DNA[1～3]了较有意义的进展。但是,为了定位带有与的分析已知表型相关的RFLP标记的基因,就必须建11单精子分型的遗传原理立相隔约10cM的遗传标记束。这样就没有基来自于一个双杂合子(例ABöab)精子,在因与RFLP间的遗传距离
6、将会小于5cM。形成配子时如果没有发生重组,则其基因型为1988年,Li等提出构建高等生物遗传图谱AB或ab。如果重组发生了,则其基因型为Ab的新方法:单精子分型技术(singlespermtyp2或aB。这两种基因型的频率取决于两个遗传标[4]ing),该方法就是直接检测单个精子PCR扩记间的重组频率。而后者又取决于它们在染色增产物在基因型上是亲本型,还是重组型。而基体上的遗传距离,遗传距离大,则有可能发生重·96·国外医学遗传学分册1998年第21卷第2期组,且重组的频率较大。这4种精子基因型的频和产量,不同的实验室在前人的基础上提出了率可通过研究来自于同一个体的大量精子而得不同的改进方法
7、。其中主要是在引物的设计方到确定。用重组型的精子数除去所检精子总数面。从只用一对通用引物到等位基因特异性引即可得到重组频率。该技术存在的困难在于难物及内嵌引物,都在不同的程度上提高了单精以确定在减数分裂前细胞中的每一个基因座上子PCR产物的产量和特异性。Li等比较了以[5]哪一个等位基因进入单精子中。上3种不同的的方法,结果表明,应用内嵌引物[7]21单精子DNA分析方法可很大程度上提高产物的特异
