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1、microRNA-99a在非小细胞肺癌中的表达及临床意义株洲市中心医院湖南省株洲市412007摘要：目的探讨分析microRNA-99a在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法将株洲市中心医院2013年1月〜2013年12月间收治的50例非小细胞肺癌患者作为观察组，将同期来院体检的健康志愿者作为对照组，收集观察组患者和对照组志愿者血清，以RT-PCR法检测总RNA中microRNA・99a的表达量并进行比较，分析microRNA-99a的表达量和观察组患者临床病理、预后的关系。结果观察组microRNA-99a的表达量明显低于对照组，(P<0.0
2、5),有统计学意义；microRNA-99a的表达量和观察组患者TNM分期、分化程度、淋巴结转移存在显著相关性，(P&t;0.05),有统计学意义；观察组microRNA-99a的表达量低者生存时间低于表达量高者,(P<0.05),有统计学意义。结论microRNA-99a在非小细胞肺癌中的表达下降和病情进展存在相关性，可作为肺癌治疗的观察指标。关键词：microRNA-99a；非小细胞肺癌;表达；临床意义木文旨在探讨分析microRNA-99a在非小细胞肺癌中的表达及临床意义,以期为临床诊断、治疗提供参考，具体报告如下：1资料与方法1.1资料
3、将株洲市中心医院2013年1月〜2013年12月间收治的50例非小细胞肺癌患者作为观察组，将同期来院体检的健康志愿者作为对照组，观察组中男性患者28例，女性患者22例。年龄36岁〜75岁,平均年龄50.2±5.7岁。组织病理类型：29例腺癌、21例鳞癌，其中45例淋巴结转移，5例未转移。本组患者均未进行过放疗、化疗治疗。TNM分期：5例I期，7例II期，20例III期，18例IV期。对照组中男性志愿者26例，女性志愿者24例。年龄34岁〜73岁，平均年龄51.0±5.9岁。两组患者的数量、性别、年龄等常规资料方面比较，(P
4、>0・05),具有可比性。1.2方法使用miRcutemiRNA提取分离试剂盒，dNTPsSYBRMastermix,RNA酶抑制剂，5×buffer＞逆转录酶等，RNA提取试剂盒、引物，RT・PCR引物序列参照文献[1],无菌及无RNA酶的条件下，按照RNA提取试剂盒的说明书来提取血清总RNA,以牛物分光光度仪来检测总RNA浓度oOD260/280比值为1.820。取血清RNA(lμg)以OligodT18浓度逆转录cDNA,反应条件为45°C下60分钊75°C下5分钟，・80°C下保存。取cDNA实施Q・PCR,PCR定量
5、条件：97°C下10分钟预变性，97°C下1分钟变性，70°C下1分钟退火，70°C下1分钟延伸，共循环40次，于末次循环后由55°C-95°C,及50°C-90°C,隔0.5°C保温30秒。microRNA-99a的相对表达情况以公式Iogl0250-Ct进行表示。1.3观察项目比较两组总RNA中microRNA・99a的表达量，分析microRNA・99a的表达量和观察组患者临床病理、预后的关系。1.4统计学方法数据结果采用SPSS17.0统计学软件进行分析处理，计数资料用('c±s)表示，采用t检验，以(P<0.05)为有统
6、计学意义。2结果2.1两组microRNA-99a的表达量比较：观察组microRNA-99a的表达量为8.58±2.98×10-6,对照组microRNA・99a的表达量为4.21±1.87×10-5,观察组microRNA-99a的表达量明显低于对照组，(P<0.05),有统计学意义。2.2microRNA-99a的表达量和观察组患者临床病理的关系，详见表一：表一microRNA-99a的表达量和观察组患者临床病理的关系由表一可见，microRNA-99a的表达量和观察组患者TNM分期、分
7、化程度、淋巴结转移存在显著相关性，(P<0.05),有统计学意义。腺癌microRNA-99a的表达量低于鳞癌，(P&t;0.05),有统计学意义。2.3microRNA-99a的表达量和观察组患者预后的关系：观察组microRNA-99a的表达量低者平均牛存期为20.41个月，表达量高者平均生存期为25.67个月，观察组microRNA-99a的表达量低者牛存时间低于表达量高者，(P<0.05),有统计学意义。3讨论肺癌属于临床常见恶性肿瘤，发病率、死亡率较高，非小细胞肺癌分为鳞癌、腺癌及大细胞癌三种，和小细胞癌相比，非小细胞肺癌癌细胞
8、的牛长分裂慢，扩散转移晚，肺癌患者中有约有80%的患者为非小细胞肺癌，约有75%的患者在发现时已为中晚期，患
