利用TLC和HPLC结合的方法定性检测尿液中的雌马酚-论文.pdf

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1、分析检测食品摹II鲥技．35，No．04，2014利用TLC和HPLC结合的方法定性检测尿液中的雌马酚王安易，程永强，欧小群，刘肖南，李婷，周韵(中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京100083)摘要：雌马酚是人体肠道细菌分解大豆苷和大豆苷元的最终代谢产物之一，采用薄层色谱~(TLC)分离纯化尿液样品中的雌马酚后再进行高效液相色谱法(HPLC)定性检测，可有效减少染料木苷元的干扰，解决了仅依靠HPLC~L法实现雌马酚有效分离的问题。以氯仿一甲醇(24：1，v／v)作为TLc展开剂，染料木苷元的R值为0．29，雌马酚的R值为0．4O。本方

2、法具有准确度高，干扰度低等优点，为定性检测尿液中雌马酚提供了新的方法。关键词：薄层色谱法，高效液相色谱法，雌马酚，大豆苷元Qualitativedetectionofurinaryequolbythin-layerchromatOgraphyandhighperformanceliquidchromatographyWANGAn-yi，CHENGYong-qiang*,OUXiao-qun，LIUXiao-nan，LITing，ZHOUYun(CollegeofFoodScience＆NutritionalEngineering，China

3、AgricuhuralUniversity，Beijing100083，China)Abstract：EquolwasoneofmetabolitesofdaidzinanddaidzeinbyintestinaIbacteriadecomposition．ThedisturbancefrOmgenisteintoequolwasreducedbyusingthin—layerchromatography(TLC)followedbyhighperformanceliquidchromatography(HPLC)．Thismethodso

4、lvedtheproblemthatequolcouldhardlYbeseparatedefectivelybyHPLC．DevelopedinaTLCsolventsystem0fchloroform：methanol(24：1)，equolandgenisteinwereobservedonRvalueof0．40and0．29．respectively．Thisnewqualitativemethodfortheanalysisofurinaryequolwasmoreaccurateandiessdisturbedthanusin

5、gonlyHPLCanalysis．Keywords：thin-layerchromatography(TLC)；highperformanceliquidchromatography(HPLC)；equol；genistein中图分类号：rI．S201．3文献标识码：A文章编号：1002—0306(2014)04—0079—05大豆异黄酮(soyisoflavones)的代谢产物之一——值低，受染料木苷元(genistein)干扰等问题，这给定雌马酚(equo1)与其前体物质大豆苷元(daidzein)相性检测雌马酚以鉴定雌马酚有效生产者

6、带来难度。比具有更高的生物活性l1-6]。雌马酚的生物活性主要人尿成分复杂，雌马酚含量较低，易受其他杂质干扰，为抗氧化和雌激素样活性，还具有降低心血管疾病发所以探索浓缩纯化尿液中的雌马酚，消除染料木苷病风险、抗肿瘤、缓解更年期症状等功B—y[7]。因此建立元干扰对雌马酚的准确定性检测具有重要意义。有效的雌马酚检测方法，对人群雌马酚生产者的鉴目前用于分离纯化异黄酮的方法主要有柱层析定，跟踪、了解人群饮食与疾病关系以及从雌马酚有法、固相萃取法、薄层色谱法等lll】。潘廖明ll2l采用聚酰效生产者体内分离筛选雌马酚肠道生产菌等均具有胺柱层析时，用

7、不同浓度甲醇洗脱，可得到含量分别重要意义。目前应用最为普遍最为广泛的检测方法为90．3O％大豆苷~fl92．O％染料木苷；Mauricio等利用是高效液相色谱法(HPLC)。李岩等罔建YT了检测人固相萃取法，并使用StrataX填料时，大豆异黄酮中各体尿样中雌马酚的HPLC~测方法，王静等删建立了组分回收率最高，平均回收率为99．37％，可用于大豆异同时检测人尿中4种异黄酮组分的HPLC检测方法，黄酮分离纯化；权静㈣利用薄层色谱法，用氯仿一甲王路等【建立了同时检测人尿中6种异黄酮组分的醇一乙酸(93：7：0．5，v／v)作为展开剂成功分离了

8、豆粕中HPLC检测方法，通过不断探索和优化HPLC检测条的大豆苷元和染料木苷元，但是将这些方法应用于分件，人尿中可有效检测出的异黄酮种类增多，但是这离纯化尿样中雌马酚的相关报道较