双酚A胁迫对蚕豆根尖细胞微核的影响-论文.pdf

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1、江苏农业科学2013年第41卷第8期．-——375-——雷忻，卢利梅，王文强，等．双酚A胁迫对蚕豆根尖细胞微核的影响[J]．江苏农业科学，2013，41(8)：375—376双酚A胁迫对蚕豆根尖细胞微核的影响雷忻，卢利梅，王文强，延志莲，董腊梅(延安大学生命科学学院，陕西延安716000)摘要：采用蚕豆根尖微核检测法，研究5种不同浓度(60、80、100、120、140mg／L)双酚A(bisphenolA，BPA)对蚕豆根尖细胞微核的诱导作用。结果显示，BPA处理豆虫根尖细胞出现明显的微核现象；在较低浓度处理组(60、8O、100ms／L)，根尖细胞微核率随BPA处理浓度的增大而逐渐升高

2、，在100mg／LBPA处理时达到最高；而在较高浓度处理组(120、140mg／L)，微核率则逐渐下降。说明BPA对蚕豆根尖细胞具有显著的遗传毒性，在一定浓度范围内，毒性随BPA浓度的增大呈先增强后减弱的变化规律。关键词：双酚A；蚕豆；根尖细胞；微核中图分类号：X52文献标志码：A文章编号：1002—1302(2013)08—0375—02双酚A(bisphenolA，BPA)作为重要的化工原料，广泛1．5em，挑选根尖一致的种子，置于培养皿中染毒。用于生产增塑剂、抗氧化剂、农药、染料、涂料等精细化工产1．2．2毒性试验根据预备试验所确定的出现微核最小的品，具有易富集和难降解等特点，毒性可

3、以通过食物链传递和BPA处理浓度和最大出现浓度，确定对蚕豆根尖进行BPA的放大，对动植物体和人类的健康产生影响，是目前环境中最常敏感浓度范围，将BPA设置5个浓度处理组(6o、80、100、见的酚类环境内分泌干扰物。120、140ms／L)进行毒性试验，同时设置空白对照组。每个蚕豆(Viciafaba)隶属豆目(Fabales)豆科(Leguminosae)处理组设置2个平行组，每组放置15粒初生根生长良好、根野豌豆属(Vicia)E33，系一年生或二年生草本植物，根系较发长基本一致的蚕豆种子，染毒4—6h。之后弃去BPA，用达，具有较强的耐寒性，对土壤的适应性较广，是一种较理想蒸馏水冲洗

4、种子3次，再放入蒸馏水内修复培养22h。的试验材料。蚕豆根尖细胞的染色体体积大而数目少，对诱1．2．3根尖制片与观察计数切取修复后的蚕豆种子根尖变因子极为敏感，是一种良好的环境监测物。钱晓薇曾报1em，用卡诺氏固定液(无水乙醇：冰乙酸=3：1)固定6—道了乙酸铜、重铬酸钾对蚕豆根尖细胞致畸效应。对于12h，加入1mol／L的盐酸，60℃的恒温水浴，使根尖水解8—BPA毒性作用的研究多见于水生动物，迄今尚未见其对10min。切取1mlTl左右的根尖置于载玻片上，采用改良品红蚕豆根尖微核影响的报道。本研究以蚕豆根尖为材料，检测染色1h，中性树胶封片。显微镜(OLYMPUSBX51TRF)下观B

5、PA对细胞微核率的诱导规律，了解其致突变作用，为环境察并拍照。每张切片随机观察根尖细胞数大于1000个，统保护和BPA监测工作提供科学依据。计出现微核的细胞数目。计算方法如下：微核细胞率=具有微核的细胞总数／观察细胞总1材料与方法数×1000％c。1．1供试材料与试剂1．2．4数据处理所有数据均采用SPSS18．0统计软件进蚕豆，购于西安市北郊胡家庙菜市场；双酚A(bisphenol行单因素方差分析(One—wayANOVA)，用LSD法进行多重A，BPA)，分析纯，国药集团化学试剂有限公司生产。比较，结果表示为平均值．4-标准差。显著性差异以P<0．051．2试验方法表示差异显著；尸<0

6、．01表示差异极显著。1．2．1蚕豆浸种、催芽选择生长饱满的蚕豆，放入盛有温2结果与分析水的大烧杯内，浸种24h，其间换水1～2次。待种子吸涨后将其放入铺有薄层湿润脱脂棉的平皿内，于25℃水浴锅内催2．1蚕豆根尖的染毒症状芽36～48h，其间换水2～3次，待蚕豆种子初生根长至1一BPA浓度为60～100mg／L时，蚕豆根颜色无明显变化，为白色或乳白色；当BPA浓度大于100mg／L时，根的颜色逐渐变深，由白色变为浅黄色、黄色、褐色，严重者甚至变为收稿El期：2013—04—09黑色。基金项目：国家自然科学基金(编号：31240076)；陕西省自然科学基2．2BPA诱导蚕豆根尖细胞微核的显微

7、观察础研究计划(编号：2012JM3012)；陕西省高水平大学建设专项资由图1可见，BPA处理后，蚕豆根尖细胞的主核旁边出现金(编号：2012SXTS03)；陕西省教育厅科学研究项目(编号：微核，为主核的1／10—1／5大小，着色与主核相近或稍浅，其2013JK0710)；陕西省延安市科学技术研究发展计划(编号：2012KS一15)；生态学陕西省重点学科专项。形态为圆形或椭圆形。作者简介：雷忻(1972一)，女，陕西延安