超顺磁性氧化铁对血管内皮细胞的生物学影响及其磁共振成像效应.pdf

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1、第39卷第2期浙江大学学报(医学版)V0l39No22010丘JOURNALOFZHEJIANGUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES)2010httpffWWW.ouril~S.zi".edu.cn/medDOI:10.3785/j.issn.1008-9292.2010.02.002超顺磁性氧化铁对血管内皮细胞的生物学影响及其磁共振成像效应谭延斌,武新英,张景峰,张敏呜(1.浙江大学医学院附属第二医院放射科,浙江杭州310009;2.浙江大学医学院附属第一医院放射科,浙江杭州310003)[摘要]目的:研究磁共振对比剂超顺磁性氧化

2、铁(SPIO)对血管内皮细胞生物学影响及磁共振成像的可能性,为SPIO对血管内皮细胞靶向性成像提供依据。方法:采用经典共沉淀法,合成柠檬酸包被的SPIO。实验组为浓度分别为0.01、0.05、0.10、0.15mg/ml的SPIO,共同孵育人脐静脉血管内皮细胞,对照组为细胞在不含SPIO的培养液中孵育。采用普鲁士蓝染色,评价血管内皮细胞对SPIO的摄取情况。采用Calcein.AM法检测细胞活性的变化。通过免疫荧光染色对血管内皮细胞的肌动蛋白、微管蛋白进行荧光染色,评价血管内皮细胞骨架的变化。采用免疫荧光染色的方法,对局部粘着斑蛋白激酶(FAK)进

3、行荧光染色,评价细胞迁移、粘附能力的变化。通过透射电镜观察SPIO在细胞内的分布及细胞内细胞器的变化。采用原子吸收分光光度计检测细胞内SPIO的含量。通过Philips3.0T磁共振,对细胞琼脂凝胶细胞悬液进行磁共振扫描,了解磁共振扫描时信号的变化。结果:血管内皮细胞按浓度依赖式摄取SPIO。与对照组相比随SPIO孵育浓度的增加,SPIO对细胞的活性的毒性增加。与对照组相比细胞的肌动蛋白、微管蛋白纤维紊乱,FAK颗粒变粗,分布稀疏。SPIO主要位于胞质的溶酶体内,随孵育浓度的增加,溶酶体的数量增多,并出现大小不一空泡样结构。当SPIO浓度为0.15

4、mg/ml时,细胞内铁含量为(55.86±9.935)Pg。磁共振扫描图像显示与SPIO共同孵育的细胞,信号出现明显的降低。结论:摄取SPIO的血管内皮细胞可以被MR检测到,但SPIO对血管内皮细胞的活性、骨架、粘附、迁移造成了一定影响,而这些影响与SPIO浓度有明显的依赖性。[关键词]磁共振成方法;内皮,血管/细胞学;脐静脉/细胞学;细胞,培养的;染色与标记;显微镜检查,电子,扫描透射;超顺磁性氧化铁;体外试验;荧光染色[中图分类号]R445.2[文献标志码]A[文章编号]1008-9292(2010)02-0118-07Magneticreso

5、nancesignaldetectionofsuperparamagneticironoxidenanoparticlesanditsbiologicalefectsonendothelialcellsTANYan.bin,WUXin-ying,ZHANGJing—feng,ZHANGMin—ming(1.DepartmentofRadiology,TheSecondAffiliatedHospital,CollegeofMedicine,ZhejiangUniveni~,Hangzhou310009,China;收稿日期:2009—12—13修回

6、日期:2010-01—27基金项目:国家863计划项目(2006AA02Z485);浙江省科技厅重大与高发疾病防治技术专项基金(2008C13027—2);浙江省自然科学基金(J20060714);浙江省医药卫生优秀青年科技人才专项基金计划(2009QN009).作者简介:谭延斌(1981一),男,硕士研究生.通讯作者:张敏鸣(1957一),女,博士,教授,博士生导师,主要从事医学影像学临床、教学、科研工作;E—mail:cjr.zhangminming@vip.163.con第2期谭延斌,等.超顺磁性氧化铁对血管内皮细胞的生物学影响及其磁共振成像

7、效应2.DepartmentofRadiology,TheFirstAffiliatedHospital,CollegeofMedicine,ZhejiangUniversity,Hangzhou310003,China)[Abstract]Objective:Toinvestigatethemagneticresonance(MR)signalchangesofsuperparamagneticironoxide(SPIO)anditsbiologicaleffectsonendothelialcells.Methods:Thecitric—ac

8、idcoatedSPIOwassynthesizedbyco-precipitationmethod.Thehumanum

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