毕赤酵母工程菌在不同培养基中生长的研究

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1、河南大学学报(医学版)2013年11月第32卷第4期273毕赤酵母工程菌在不同培养基中生长的研究赵炎葱，李景华，刘敏(1．河南大学东京医院检验科，河南开封475001；2．河南大学天然药物与免疫X-程重点实验室，河南开封475004)摘要：目的确定重组PichiapastorisGS115Muts菌株更适合的培养基和最佳接种时间。方法采用3种不同的培养基(YPD培养基、BMGY培养基争复合培养基)培养重组PichiapastorisGS115Muts菌株，分别在4h和24h的时间间隔下，采用比浊法对酵母菌96h内的生长进行OD值测定。结果复合培养基和YPD

2、培养基是3种培养基较为合适的，且在12～24h之间是重组酵母茵的对数生长期，此时是接种的最佳时间。结论合适的培养基和适当的接种时间对巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)的培养关系密切。关键词：毕赤酵母；培养基；发酵中图分类号：R318．0文献标识码：A文章编号：1672—7606(2013)O4一O273一O3TheeffectthatdifferentculturemediumgivetothegrowthofPichiapastorisyeaststrainZHAOYancong，LIJinghua，LIUMin(1．TheFirstHosp

3、italAffiliatedtoHenanUniversity，Kag，Henan475001，China；2．KeyLabofNaturalMedicineandImrnunalEngineering，Kang，Henan475004，China)Abstract：0bjectiveThisExperimentistestingthemostsuitableculturemediumandtherighttimewhentheseedliquidismostapplicable．MethodsTherearethreekindsofculturemedi

4、uminthisexperiment—YPD，BMGY，andcompoundculturemedium．TheyareusedtoreformanewstrainnamedPichiapastorisGSj15Mut．The0DiStestedevery4and24hours，within96hours，inthewayofturbidimetricmethod．ResultsThecompoundculturemediumandtheYPDarethebetterculturemediuminthreemediums．Andthebesttimetov

5、accinateistheperiodbetween12and24hours．ConclusionPichiaPastorisyeaststrainiscloselyrelatedtOthesuitablemediumandappropriateinoculationtime．Keywords：Pichiapastorisculturemedium；fermentation毕赤酵母(Pichiapastoris)是近十几年兴起的基因工程菌的高密度培养是外源蛋白被宿主菌真核表达系统，此系统具有原核生物发酵速度快、简高效表达的一个重要途径，也是当前发酵领域的一

6、个便的特点。是在外源蛋白表达方面应用比较广泛的重要研究方向_4]。在重组毕赤酵母的发酵工艺中，培一套工具。到目前为止，已成功表达了200多种来自养的目的是扩增菌体，其直接影响后续的发酵效果是病毒、细菌、真菌、动植物和人的蛋白，如人白介素、人否优质。中国工程院院士沈倍奋[5提出制约目前产血清白蛋白、乙肝表面抗原、水蛭素衍生物等。自物产量和质量的瓶颈之一就是优化培养基和培养条Cregg等[1在1987年发现外源蛋白还可表达于甲醇件。王洪刚[6在对质粒转染效率的研究发现，质粒的营养型毕赤酵母以来，此表达系统表达的外源蛋白包种类剂量及转染细胞的浓度直接影响转染质粒

7、报告含了肿瘤坏死因子[2]、鼠表皮生长因子[3]等贵重药基因的表达。物。文献中提出了各种种子培养基，如MM、MD、收稿日期：2013—09—30基金项目：河南大学科学研究基金(2010YBZR001)。作者简介：赵炎葱(1982一)，女，河南巩义人，检验师，从事医学检验工作。274JournalofHenanUniversity(MedicalScience)Nov．2013Vo1．32No．4MGY、BMGY、YPD、MGyB等。本实验以YPD、1．2方法BMGY和复合培养基3种培养基进行了比较，以找从一7O℃冰箱中取出GS115Muts菌种化线接出最合

8、适的培养基和最佳的培养时间，为进一步实验种到YPD平板上，置于生化