梯度洗脱程序设置.doc

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1、梯度洗脱程序的设置梯度洗脱：乙腈/水体系。初始比例：乙腈:水=70%：30%。保持2分钟；10分钟内渐变为100%：0。保持10分钟。液相的软件界面如下图（泵的控制部分）：1、将“泵数”处设置为“2”。在上图的左下角位置。2、在“初始流量”处设置为A泵（输乙腈）：70%；软件会自动将B泵（输水）设为30%。设置后见下图。3、在时间表的时间处输入“2”（指初始比例保持时间），A处输入“70”，按“加入”。设置后见下图。4、在时间表的时间处输入“12”（10分钟加上初始保持时间等于12），A处输入“100”，按“加入

2、”。设置后见下图。5、在时间表的时间处输入“22”（见下面的注1），A处输入“100”，按“加入”。设置后见下图。注1：到前一步的总时间为12分钟，加上这一步需要10分钟，等于22分钟。6、在时间表的时间处输入“22.001”，A处输入“70”，按“加入”。设置后见下图。当切换进样阀至INJECT状态时，软件就会自动按上面的梯度程序来控制泵了。当按下软件的停止按钮时，梯度程序会自动中止。上面的操作步骤中，第5步和第6步也可以不设置。等样品中所有组份都出峰后按下软件的停止按钮时，梯度程序会自动中止，同时流动相比例回

3、到初始流量处所设置的比例。两次进样的间隔时间要求不少于十分钟（需要等基线稳定后才能进下一次样品）。重要提示：1、液相色谱所用的水必须为超纯水或双蒸水，也可以直接购买“娃哈哈”等品牌的纯净水代替。绝对不能使用矿泉水。2、如果是超纯水或双蒸水，一般要求当天制备当天使用（不要超过三天）。3、如果是购买的市售的纯净水，必须当天开封当天使用（不要超过三天）。4、实验表明，纯水放置一天后即有细菌存在。如果纯水中含有5%-10%的有机物（如甲醇、乙腈），可以放置三至五天，放置三天后即有细菌存在。5、每天做完实验后，用纯甲醇（使

4、用输纯水的那台泵来输液）冲洗系统30分钟以上。