草苁蓉多糖提取物诱导人喉癌Hep2细胞凋亡的实验研究.pdf

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1、陕西医学杂志2014年8月第43卷第8期947草苁蓉多糖提取物诱导人喉癌Hep2细胞凋亡的实验研究延安大学附属医院耳鼻喉科二病区(延安716000)张军张耀明△王正辉▲汪立摘要目的：探讨草苁蓉多糖提取物(BRP)对人喉癌Hep2细胞的抗瘤作用。方法：采用高通量色谱仪分析多糖提取物成分，流式细胞仪分析细胞周期及凋亡蛋白，westernblot检测细胞凋亡相关蛋白变化。结果：高通量色谱分析仪发现BRP成分单一，BRP对细胞的抑制率呈时间和浓度依赖性。细胞周期分析发现BRP使细胞滞留于G。／O期。与对照组相比，不同浓度的BRP(100

2、～400g／m1)明显诱导细胞的凋亡。Westernblot结果发现BRP作用后，pro—caspase一3，pro—caspase一8和pro—caspase一9蛋白分裂增加，同时死亡受体DR5和Bax表达增加，而Bcl一2表达减少。结论：研究发现BRP主要通过使Hep2细胞周期变化和凋亡来抑制细胞的生长，其途径主要包括线粒体内部途径和死亡受体外部途径来完成。主题词喉肿瘤@Hep2细胞细胞凋亡【中图分类号】R739．65【文献标识码】Adoi：10．3969／j．issn．1000—7377．2014．08．004Polvsa

3、ccharideOfboschniakiarossicainducesapoptosisonHep2cellsDepartmentofOtolaryngology，theAffiliatedHospitalofYah’anUniversity(Yan’an716000)ZhangJunZhangYaomingWangZhenghuietalABSTRACTObjective：Theaimofthisstudywastoexploretheanti-tumorpotentialofapolysaccharidei—solatedf

4、romBoschniakiarossica(BRP)inHep2humanlarynxsquamouscarcinomacells．Methods：Byanalyzingtheextractpolysaccharidesofhigh-throughputchromatography，cellcycleandapoptosiswereanalyzedbyflowcy—tometrytochangesinprotein，apoptosiswasdetectedbyWesternblotrelatedprotein．Results：H

5、ighperformancesize-exclusionchromatographyanalysisshowedthatBRPwasahomogeneouspolysaccharide．BRPsuppressedtheproliferationofHep2cellsinatime—anddose—dependentmanner．CellcycleanalysisrevealedthatexposuretOBRP(200Fg／m1)causedaG0／G1cellcyclearrestinHep2cells．Moreover，tr

6、eatmentwithBRPat100—400~g／mlfor24hinducedasignificantapoptosisHep2cellscomparedtOuntreatedcontrolcells，asdeterminedbyflowcytometrywithannexin-V／propidiumiodidedoublestaining．Additionally，BRPtreatmentpromotedthecleavageofpro～easpase一3，pro—caspase一8，andpro—caspase一9，co

7、upledwithincreasedexpressionofdeathreceptorDR5andBaxandreducedexpressionofBcl一2．Conclusions：Takentether，ourdatademonstratethatBRPshowspotentantitumoractivityinhumanlarynxsquamouscarcinoma，largelythroughinductionofG0／G1cellcyclearrestandapoptosis．Activationofbothmitoc

8、hondria—-mediatedanddeathreceptor-mediatedapoptosispathwaysisinvolvedinthecytotox、．icityofBRP．KEYWORDSLaryngealneoplasms@Hep2ceilsA