蜂胶体外诱导人喉癌细胞hep2凋亡的实验研究

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1、418陕西医学杂志2008年4月第37卷第4期·临床研究·蜂胶体外诱导人喉癌细胞Hep一2凋亡的实验研究△河北工程大学医学院检验系(邯郸056029)王菊香门金娥‘郑海平’张向阳。摘要目的：探讨蜂胶对喉癌细胞珠Hep一2凋亡的影响及作用机制。方法：应用MTT、透射电镜、原位末端标记法观察药物对细胞的抑制率及凋亡形态、凋亡率变化。结果：MTT测得细胞抑制率随时间、剂量而增大，透射电镜下见到凋亡细胞及凋亡小体形成，原位末端标记检测出细胞凋亡率亦有时间、剂量依赖性。结论：蜂胶能够抑制喉癌细胞生长，其抑制作用是通过诱导喉癌细胞凋亡而起作用的。主题词喉肿

2、瘤／药物疗法蜂胶／治疗应用细胞凋亡@Hep一2细胞Experimentalstudy：HumanlaryngealcarcinomacellsapoptosisinducedbypropolisDepartmentofLaboratory，MedicalCollege，HebeiEngineeringUniversity(Handan056029)WangJvxiangMenJin’eZhengHaipingetalABSTRACTObjectivelToinvestigatetheinductionofapoptosisanditspossi

3、blemechanismsinpropolis—treatedhumanlaryngealsquamouscellcarcinomastrainHep-2．Methods；MTT，electronmieroseope，terminaldeoxynudeotidyltransferrasedUTPnickandlabeling(TUNEL)wereconductedtoobserveapoptosiaindexandapoptosismorphous．Results：Inhibitionrateincreasedwithtimeanddose，w

4、hichweremeasuredbyMTT．Thereweredose-effectrelationshipamongallsamples．Apoptosiscellsandapoptosisbodieswerefoundunderelectronmicroscopy．ApoptosisindexincreasedwithtimeanddosedependencebyTUNEL．Conclusion：PropoliscaninhibithumanlaryngealsquamouscellarcinomastrainHep一2．It’sinhib

5、itiveactionmaybethroughinducinghumanlaryngealcarcinomacellsapoptosis．KEYWORDSLaryngealmuscles／drugtherapyPropolis／therapeuticuseApoptosis@Humaularynegealsquamouscell喉癌是耳鼻咽喉科常见的恶性肿瘤，手术治疗虽然是其首选方法，但是对于晚期的喉癌患者单纯手术治疗难以获得满意的疗效或是失去了手术的时机，因此其他治疗方法就尤为重要。蜂胶是含有多种黄酮、阿巍酸、槲皮素、肉桂酸衍生物、多糖、氨基

6、酸等有药理活性的化合物。它不仅具有抗病原微生物、抗氧化、抗炎作用外，还具有抗肿瘤作用。为进一步探讨其抗癌作用机理，我们观察了蜂胶对喉癌Hep一2细胞凋亡的影响，现报道如下。材料与方法1材料蜂胶提取物：取本地产蜂胶，冰冻粉△河北省科技厅资助课题(07276101n17)*河北工程大学临床医学院中心实验室碎后以95％乙醇浸泡72h，过滤，滤液于40℃减压挥干溶剂，二甲基亚砜(DMS0)溶解定容为2mg／ml，实验前用RPMI1640(Gibco公司)稀释成40、80、120、160mg／ml，DMSO的浓度低于0．02％。试剂及主要仪器：RPMll

7、640培养液为美国GIBC0公司产品。POD试剂盒购自华美生物工程公司；透射电镜为日立H-600型。细胞株：人喉鳞状细胞癌Hep一2细胞株由白求恩国际和平医院耳鼻喉头颈外科实验室惠赠。2方法四甲基偶氮唑盐比色分析法(MTT)测定蜂胶对Hep一2细胞存活率的影响：当细胞数达到106左右时接种到96孔板，每孔加入1×104个细胞／50弘I，细胞贴壁后，在对数生长期加入不同浓度的蜂胶分别作用24h、48h、72h后，加MTT4h后倾去上清液，加入DMSO充分溶解形成结晶，用酶标仪读取万方数据陕西医学杂志2008年4月第37卷第4期419(570nm)

8、，OD值，以上实验均重复2次，每一浓度6个复孔，并设阴性对照。根据对照细胞OD值，计算出抑制率，抑制率一(对照组OD值一实验组OD值)／对照组OD值×