巴西橡胶树1个mlo基因克隆及其序列特征分析

《巴西橡胶树1个mlo基因克隆及其序列特征分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中国麈学c童提2013，29(31)：21—26ChineseAgriculturalScienceBulletin巴西橡胶树1个Mlo基因克隆及其序列特征分析覃碧。，王萌，薛松，胡中昀。，郑服丛，张宇(中国热带农业科学院橡胶研究所／农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室，海南儋州571737；海南大学环境与植物保护学院，海口570228；海南大学应用科学技术学院，海南儋州571737)摘要：Mlo基因是植物抗病基因的重要成员。巴西橡胶树Mlo的克隆将为进一步通过转基因技术培育抗病橡胶树新品种奠定基础。本研究以大麦M1o蛋白序列为探针对橡胶树EST和转录组数据库进行同源搜索，并对同源

2、EST序列进行拼接，得到橡胶树MIo的cDNA序列。进一步通过RT-PCR扩增，成功克隆了橡胶树MIo基因，其编码区(CDS)为1668bp，编码555个氨基酸，分子量为63．14kDa，等电点是8．85。对所克隆的橡胶树Mlo编码蛋白结构进行分析发现，该蛋白具有Mlo保守结构域，包含8次跨膜结构。聚类分析发现，橡胶树Mlo蛋白与木薯Mlo同源性最高，达到92．1％，其次是蓖麻(87．6％)；在拟南芥基因组中，与AtMlo8的相似性最高，达到67％，因此，将橡胶树中克隆的Mlo基因命名为HbMlo8。通过对HbMlo8基因分析可知，该基因属于Mlo家族成员，基因的克隆及其序列分析为进一步

3、验证HbMlo8在橡胶树中的生物学功能奠定基础。关键词：巴西橡胶树；HbMlo8；克隆；序列分析中图分类号：Q781文献标志码：A论文编号：2013—1414CloningandSequenceCharacterizationofAGeneinHeveabrasiliensisMul1．Arg．QinBi，WangMeng2，XueSong3，HuZhongyun3，ZhengFucong2，ZhangYu2(KeyLaboratoryofBiologyandGeneticResourcesofRubberTree,MinistryofAgriculture~RubberResearch

4、Institute,ChineseAcademyofTropicalAgriculturalSciences，DanzhouHainan571737；2EnvironmentandPlantProtectionCollege,HainanUniversity,Haikou570228；CollegeofAppliedScienceandTechnologyofHainanUniversity,DanzhouHainan571737)Abstract：Mloisanimportantmemberofplantdiseasesresistancegenes．Cloningandsequenc

5、eanalysisofgeneinHeveabrasiliensiswilllaythefoundationforbreedingdiseaseresistantvarietiesthroughthetransgenictechnology．Inthisstudy，thebarleyMlowasservedasaquerytosearchintheESTandtranscriptdatabasesofHeveabrasiliensis,andthenthehomologousESTwereassembled．TheCDSfragmentofHeveagene(1668bp)hadbeen

6、successfullyclonedbyRT—PCR．TheHeveaencoded555aminoacidresidues，withapredictedmolecularmassof63．14kDaand8．85isoleetricpoint．ThestructureanalysisrevealedthatHeveaMloproteinhadaconservedMlodomainand8transmembranedomains．PhylogeneticanalysisshowedthatHeveaMlosharedthehighestsimilaritywiththeMloprotei

7、nsfromManihoteseulentaandRicinuscommunis,with92．1％and87．6％sequenceidentities．IntllegenomeofArabMopsisthaliana,He唧MIosharedthehighestsimilaritywithAtMlo8with67％identicalresidues．Therefore．tlleHeyeajlclonedinthisstudywas