白藜芦醇对氧糖剥夺/再灌注损伤的pci2细胞的保护作用及其作用机制

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1、现代生物医学进展www.shengwuyixue.comProgressinModernBiomedicineVoL14NO.8MAR.2014·1423·doi:10.13241/j.cnki.pmb.2014.08.006白藜芦醇对氧糖剥夺/再灌注损伤的PC12细胞的保护作用及其作用机制冰刘宣王海嵘刘佳福陈向军卢孔渺潘曙明(1上海交通大学医学院附属新华医院急救中心上海200092;2复旦大学医学院附属华山医院神经内科上海200040)摘要目的:探讨白藜芦醇对氧糖剥夺/再灌~(OGD/R)损伤的PC12细胞的保护作用及其机制。方法:体外培养PC12细胞,分为对照组。白藜芦醇组,OGD/R组

2、及OGD+白藜芦醇组。以改良的噻唑蓝法测定细胞活性,采用AnnexinV—FITC/PI双染法检测细胞的凋亡率,用双氢罗丹明(DHR)检测细胞内活性氧簇(ROS)的水平,采用蛋白印迹法(westernblot)分析SIRT1的蛋白表达情况。结果:与对照组相比,经过OGD/R损伤后,细胞活力显著降低。而在OGD/R的同时给予10tzmol/L的白藜芦醇处理,可以明显提高细胞活力。流式细胞仪检测发现,10t~mol/L的白藜芦醇可以显著地减少OGD/R引起的细胞凋亡,抑制细胞内的ROS产生。westemblot的结果提示,与对照组比较,白藜芦醇可提高SIRT1的蛋白表达水平。结论:白藜芦醇可以通

3、过抑制ROS的产生和上调SIRT1的表达等机制而发挥其对抗氧糖剥夺/再灌注损伤的神经保护性作用。关键词:白藜芦醇;氧糖剥夺/再灌注;细胞凋亡;ROS生成;SIRT1中图分类号:R743。Q593.2文献标识码:A文章编号:1673—6273(2014)08—1423—05ProtectiveEffectofResveratrolontheInjuryofPC12CellsInducedbyOGD/RandItsMechanisms*L1-UXuan1,WANGHai-rongI,LIUJia-fuI,CHENXiang-jun2,LUKong-miaoIPANShu-mingJ(1Depar

4、tmentofEmergency,XinhuaHospital,ShanghaiJiaotongUnivemi~SchoolofMedicine,Shanghai,200092,China;2DepartmentofNeurology,HuashanHospital,FudanUniversitySchoolofMedicine,Shangha~20004o,China)ABSTRACTObjective:Toinvestigatetheprotectiveefectofresveratrol(RSV)ontheinjuryofPC12cellsinducedbyoxygenglucosed

5、eprivation/reperfusion(OGD/R)anditsmechanisms.Methods:PC12cellsculturedinvitroweredividedintocontrolgroup,RSVgroup,OGD/RgroupandOGD/R+RSVgroup.ThecellviabilitywasassessedbythemodifiedMTTmethod.AnnexinV—FITC/PIdoublestainingwasusedtodetectapoptosisrate.DHR123wasusedtomeasurecellularROSlevels.Western

6、blotwasusedtostudytheexpressionlevelofSIRT1.Results:Comparedtothenormalcon~olgroup,thecellviabilitydecreasedsignificantlyafterOGD/Randgiving10p,mol/LRSVduringOGD/Rcouldsignificantlyincreasecellviability.Basedontheresultsofflowcytometry,wefound10ixmol/LRSVmarkedlyinhibitedOGD/R.inducedapoptosisandre

7、ducedintracellularROSgeneration.ResultofWestemblotshowedtllatRSVcouldincreasetheexpressionofSIRT1comparedwithcontrolgroup.Conclusion:RSVwasfotmdtohaveaneuroprotectiveefectagainstOGD/R-inducedinjurybyattenua

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