课题1 微生物的实验室培养学案(二).doc

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1、课题1微生物的实验室培养学案（二）编写：赵战锋审核：高二生物组【学习目标】了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。【学习重点】无菌技术的操作【学习难点】无菌技术的操作【学习过程】实验操作一--大肠杆菌的纯化培养：本实验所用的培养基是,本实验可分成和两个阶段进行。（一）制备牛肉膏蛋白腺固体培养基1＞制备牛肉膏蛋白腺固体培养基的操作步骤是:K思考5』在制备牛肉膏蛋白腺固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是什么?溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？K思考6为牛肉膏和蛋白豚主要为微生物提供什么等营养物质?2、倒平板：待培养基冷却至匕左右时在酒精灯火

2、焰附近操作进行。其过程是:%1在火焰旁右手拿,左手;%1使锥形瓶的瓶口;%1左手将培养皿,右手,立刻盖上皿盖。%1待平板冷却凝固后，将平板oK思考7习锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么?K思考8』倒平板的目的是什么?K思考9』若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么?K思考io》配制斜面培养基作用是什么？，试管为什么要加塞棉塞?（二）、纯化大肠杆菌微生物接种：最常用的是法和法。1.平板划线法是的操作，将聚集的菌种逐步鯉分散到培养基的表面。其操作步骤是：①将在酒精灯火焰上灼烧直至O②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。③将菌种试管

3、口通过火焰达到的目的。④将冷却的接种环伸入到O⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。⑥将皿盖打开一条缝隙，把接种环,盖上皿盖，不要划破培养基。⑦灼烧接种环，冷却后从划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。注意不要将相连。⑧将平板培养。K思考112取菌种前灼烧接种环的目的星什么？为什么除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环?取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目的是?最后灼烧接种环的目的是?在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是?1.稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀程，然后将行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌番。系列稀释

4、操作:%1取盛有mL水的无菌试管6支,编号101、102>103、104>105>106«%1用灼烧冷却的移液管吸取—mL菌液注入编号为101试管中，并吹打3次使之混匀。%1从101倍液中吸取mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀，获得102倍液。依此类推。K思考123系列稀释操作的注意事项是什么?K思考133涂布平板操作的步骤是什么？结果分析与评价1培养未接种培养基的作用是什么？，若有菌落形成，说明什么?2在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落颜色？形态?培养12h和24h后的菌落大小菌落分布位置？原K思考143在某培养基上出现了3种特征不同的菌落是什么原因?K思考频繁使

5、用的菌种利用什么法保存？长期保存菌种的方法是什么?【习题练习】1.制备牛肉膏蛋白豚固体培养基的步骤是（）A.计算、称量、倒平板、溶化、灭菌2.B.C.D.计算、称量、溶化、倒平板、灭菌计算、称量、溶化、灭菌、倒平板计算、称量、灭菌、溶化.倒平板有关倒平板的操作错误的是A.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上B.使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C.将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上等待平板冷却凝固后需要倒过来放置3.有关平板划线操作正确的是（）A.使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B.打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞c.将沾有菌种的接种

6、环迅速伸人平板内，划三至五条平行线即可D.最后将平板倒置，放人培养箱中培养有关稀释涂布平板法，叙述错误的是・・・（）A.首先将菌液进行一系列的梯度稀释B.然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面再放在适宜条件下培养5.D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落涂布平板操作需要用到A.接种环、滴管、酒精灯B.接种环、移液管、酒精灯C.涂布器、移液管、酒精灯D.涂布器、接种环、酒精灯当堂检测卡1.下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是（）A含碳有机物C含碳无机物B蛋白豚D花生粉饼等天然物质2.平板冷却凝后要将平板倒置，其意义是（）A利于大肠杆菌的接种B防止杂菌污染C

7、利于培养的冷却D防止皿盖冷却水倒流入培养基3・含C、H、O、N的大分子化合物可以作为（）A异养微生物的氮源、能源B异养微生物的碳源、氮源C自养微生物的氮源、能源、碳源D自养微生物的氮源、能源、碳源4.菌种保藏应控制的条件是（）（1）湿度（2）低温.（3）干燥（4）有光（5）隔绝空气（6）适当有氧A.（1）（4）（6）B.(2)(3)(6)C.(1)(5)(6)D.(2)(3)(5)5.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗?为什么？6.在做第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线?