依托咪酯对小鼠诱导分化神经元缝隙连接子表达量的影响

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1、·462·中国现代神经疾病杂志2010年8月第10卷第4期ChinJContempNeurolNeurosurg,August2010,Vo1.10,Ⅳo__4.论著·依托咪酯对小鼠诱导分化神经元缝隙连接子表达量的影响齐正金旭王保国【擒要】目的观察全身麻醉药物依托咪酯对P19细胞诱导所获得的神经元缝隙连接子表达的影响,以揭示依托咪瑟弓l起神经外科手术患者意识迅速丧失可能的分子学机制。方法P19细胞经体外培养诱导分化为可特异性表达微管蛋白之神经元,免疫荧光细胞化学染色检测依托咪酯对神经元缝隙连接子表达的影响。结果依托咪酯和生胃酮处理P19细胞30s和60min后,免疫荧光细胞化学染色即可发现神经

2、元缝隙连接子表达受到抑制,缝隙连接蛋白36(Cx36)阳性细胞数目显著减少,与对照组比较差异具有统计学意义(3Os:t=一50.423,P=O.000;60min:t:.25.826,P=0.000);随着处理时间的延长,其抑制效应逐渐降低,与药物处理前比较差异无统计学意义(均P>0.05)。处理30s时,依托咪酯和生胃酮对神经元缝隙连接子的抑制效应相似(P>0.05),而随着药物处理时间的延长,相同作用时间、相同作用对象依托咪酯对神经元缝隙连接子的抑制效应逐渐增强且优于生胃酮组,以处理60min时二者差异最大=.2.782,P=0.oo8)。结论依托咪酯可能通过抑制神经元缝隙连接子的表达水平

3、而降低神经元细胞问缝骧连接通讯,能够部分解释依托咪酯在麻醉诱导过程中引起患者意识迅速丧失的可能的分子学机制。【关键词】依托咪酯;麻醉,全身;连接蛋白类;缝隙接合部;细胞,培养的DOI:10.39690.issn.1672-6731.2010.04.015TheinfluenceofetomidateonconnexonsofinduceddifierentiatedneuronsinmouseQtZheng,JINXu,ⅣGBao-guo.‘DepartmentofAnesthesiology,BeijingTiantanHospital,CapitalMedicalUniversity,Be

4、10005~ChinaCorrespondingauthor:WANGBao—guofEmail:wbgttyy@sina.com)[Abstract]0bjectiveToexploretheeffectofgeneralanesthetic,etomidate,ontheexpressionofconnexonsinneuronsinducedbyP19cells,andillustratethemolecularmechanismofpatientsconsciousnesslOssafteretomidateadministrationbymeansofimmun0cyt0chemis

5、try.MethodsTheP19cellswereretro·inducedtostemcells,whichwerethenoriented.inducedtoneuronstoreceiveneuronidentification.TheneuronswerethenallocatedintogroupE(etomidate),groupCAR(carbenoxolone),groupLE0ipidemulsion)andgroupCON(phosphatebuffersolution,contro1).Agentsadministratedrespectivelywerewithdra

6、wnin30s,60minand120min,andconnexin36(Cx36)werecountedthroughinfereneeofiramunoeytoehemistry.ResultsCx36weremoresuppressedforgroupEandgroupCARthangroupCONin30sand60rain(30s:t=一50.423,P=0.000;60rain:t=一25.826,P=O.ooo).Asfortheinnergroupanalysis,groupEandgroupCARbareddeclinedsuppressiveeffectswithevenn

7、ostatisticvariancein120raincomparedtOtherespectiveuntreatedtimepoints;asforgroupLEandgroupCON,nostatisticvarianceexistedbetweendiferenttimes.Intergroupanalysisshowedthatsignificantsuppressiveeffectsin

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