吴茱萸、甘草浸提液对亚硝化反应清除及阻断作用的对比研究

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1、北京师范大学珠海分校学刊68JournalofBeijingNormalUniversity,Zhuhai201306吴茱萸、甘草浸提液对亚硝化反应清除及阻断作用的对比研究张成1)1)1)1)董侯燕李爽曲悠扬唐梓意2)1)1)1)蔡曙杰杨虹颜亨梅(1)北京师范大学珠海分校工程技术学院生物工程系,519087,广东,珠海;2)珠海市出入境检验检疫局,519087,广东,珠海)摘要为考查吴茱萸(Tetradiumruticarpum)和甘草(Glycyrrhizae)的浸提液对亚硝酸钠清除作用和对3)正交试验法浸提活性成分,并

2、测定对N-亚硝基化合物合成的阻断作用,及其两者作用效果比较。采用L9(3亚硝酸钠的清除率以及对N-亚硝基化合物合成的阻断率,确定最佳浸提工艺条件。以亚硝酸钠清除率为考察指标,吴茱萸最佳浸提工艺下对亚硝酸钠最大清除率为0.8365;而甘草最佳浸提工艺条件下最大清除率为0.5580。以对N-亚硝基化合物合成的阻断率为考察指标,吴茱萸最佳浸提工艺条件下对N-亚硝基化合物生成最大阻断率为0.9228;而甘草最佳浸提工艺条件下最大阻断率为0.6256。结果显示无论以对亚硝酸钠清除率为考察指标,还是以对N-亚硝基化合物合成的阻断率为考

3、察指标,吴茱萸对亚硝化反应的抑制作用均强于甘草。关键词吴茱萸;甘草;浸提液;阻断;清除;亚硝酸钠;N-亚硝基化合物[3]有关这方面的研究报道较少。0引言甘草(Glycyrrhizae)在中草药中具有“众药癌症是当前威胁人类生活的最大杀手,被称之王”的美誉,其主要成分有甘草三菇皂贰类、甘为“不治之症”。亚硝胺能引起人体和动物的肝脏草黄酮类、甘草多糖类化合物。随着现代医学对等多种器官的恶性肿瘤,是最令人关注的一类化甘草的研究,发现甘草酸(又名甘草甜素)不仅有学致癌物。它不仅存在于食品、烟草和饮用水中,抗炎、抗HIV、提高人体免

4、疫力等功效,还可以抗[4]也可由前体仲胺和亚硝酸盐合成,尤其是在人和艾滋病毒,对SARS亦有抑制作用。动物胃中更适合合成亚硝胺。亚硝胺在一系列酶吴茱萸(Tetradiumruticarpum)又名淡茱的作用下,生产可使核酸烷化的亲电子的烷基自萸、吴萸,是芸香科植物吴茱萸接近成熟的果实,由基,从而引起细胞遗传突变显示致癌性,阻断或有小毒,多炮制后入药。国外对吴茱萸的药理研减少亚硝胺的生成是预防肿瘤发生的一个重要措究表明其具有扩张血管、增加血流量、降血压、改[1]施。善微循环、溶栓、抗溃疡等广泛作用。与此同时,黄酮类化合物是一

5、类小分子天然植物成分,国内对吴茱萸成分研究表明其提取物中含有大量[5-6]广泛存在于蔬菜、水果和药用植物中,具有抗氧的皂苷类、黄酮类和酚酸类成分。化、防癌抗癌以及抗糖尿病并发症等多种生理活鉴于吴茱萸、甘草这两味中药中皆含有能防[2]性和药理作用。而中国有得天独厚的中草药资癌抗癌的黄酮类化合物,本试验进一步通过体外源,研究各种中草药在防癌抗癌方面的功能和药模拟人体胃液的条件,探讨天然吴茱萸、甘草浸提效,从而开发安全、高效的防癌抗癌天然药品和保液抑制亚硝化反应活性物质的最佳浸提工艺条健品是一项极有现实意义的工作。中草药防癌抗件

6、,研究和对比吴茱萸、甘草浸提液清除亚硝酸盐癌活性表现的一个方面是清除亚硝酸盐和阻断亚以及阻断N-亚硝基化合物的合成的效果,为吴茱硝胺的合成即对亚硝化反应的抑制作用上,目前萸、甘草的合理利用提供一定的科学依据,同时为国家自然科学基金资助项目(30970421);珠海市农业科技三项资金资助项目(2011014)收稿日期:2013-03-29张成等:吴茱萸、甘草浸提液对亚硝化反应清除及阻断作用的对比研究69研究开发亚硝化反应抑制剂提供参考。浸提剂作空白对照,最后计算清除率Yc。Yc=(A0-Ax)/A01材料与方法式中A0为加入

7、相应浸提剂空白实验的吸光度1.1原料与试剂吴茱萸、甘草:珠海市北京师值;Ax为加入不同浓度浸提液时的吸光度值。范大学珠海分校药店购买的中药吴茱萸、甘草,放按上述方法,另分别取最佳浸提工艺条件下置实验室密封储藏备用。获得的吴茱萸、甘草浸提液0.5、1.0、1.5、2.0、无水乙醇;柠檬酸钠-盐酸缓冲液(自制);亚2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0mL进行亚硝酸盐清硝酸钠;二甲胺溶液;碳酸钠;α-萘胺;对氨基苯磺除率的浓度梯度测定,计算每一浓度下的清除率。酸;N-1-萘乙二胺盐酸盐;聚酰胺粉100~200目1.3.

8、4N-亚硝基化合物合成阻断率的测定在等试剂均为分析纯。模拟人体胃液的条件下,二甲胺与亚硝酸钠在1.2主要仪器UV752型紫外可见分光光度计pH3.0,37℃条件下,可适宜地生成二甲基亚硝(Phenix凤凰);ZF-I三用型紫外分析仪(上海顾[7,9]胺(NDMA),反应式如下:村电光仪器厂);EPED-

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