泥鳅蛋白ACE抑制肽的分离及稳定性研究.pdf

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1、食品科技201a．~第38卷第O嘲FOODSCIENCEANDTECHNOLOGY提取掬与应用泥鳅蛋白ACE@$g肽的分离及稳定性研究胡勇’，姚东瑞，盘赛昆，周鸣谦(1．淮海工学院海洋学院，连云港220005；2．江苏省中科院植物研究所，南京210000)摘要：对泥鳅蛋白水解液血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽进行初步的分离纯化(超滤，凝胶过滤色谱)，并研究其代表性组分的消化稳定性。结果表明平均相对分子质量越低的组分，相同质量下抑制活性越强；经超滤和SephadexC一15分离纯化后的小分子肽组分AP4有较高的A

2、CE抑制活性和消化稳定性，相对分子质量(Mr．)在650。关键词：肽；血管紧张素转化酶；超滤；消化稳定性中图分类号：R284．2文献标志码：A文章编号：1005—9989(2013)06—0247—03IsolationandstabilityofACEinhibitorypeptidefrOmloachHUYong，YAODong—rui，，PANSai—kun，ZHOUMing—qian(1．SchoolofMarineScience，HuaihaiInstituteofTechnology，Lianyun

3、gang222005；2．InstituteofBotany，JiangsuProvinceandChineseAcademyofSciences，Nanjing210014)Abstract：TheisolationandstabilityofAngiotensinI-convertingenzyme(ACE)inhibitorypeptideofloachwerestudiedinthispaper．TheresultsshowedthatthefractionwithlowerMrhavethehighe

4、rACEinhibitoryactivity．AP4(Mr．650)withhigherACEinhibitoryactivitywasobtainedfromtheloachhydrolyzatesbyUFandSephadexG一15geIfiltrationchromatography．ThisfractiondemonstratedhighstabilityagainstgastrOintes“nalproteases．Keywords：peptides；AngiotensinI-convertinge

5、nzyme(ACE)；ultrafiltration；stability生物活性肽是一种分子量较低的小分子蛋多肽组分的纯化方法主要有超滤(UF)、离子交换白，具有较强的生物活性⋯，在其降血压、抗氧(IE)、凝胶过滤(GPC)、反相高效液相色谱(RP—化、调节免疫等多种生物活性中，尤以降压功能HPLC)。又由于酶解液主要是由蛋白酶水解而最具代表性【。蛋白水解液是由多种可溶性大分子得，在体内消化吸收过程中势必受到人体胃和蛋白、多肽、氨基酸组成的混合溶液，对其中功胰蛋白酶的消化影响，因此酶解液的消化稳定能性成分的分离

6、研究是现今多肽研究的基础。性研究是泥鳅降压肽的制备工艺可靠性的重要收稿日期：2012—12—24通讯作者基金项目：中央财政支持地方高校发展专项资金项目(CXTDIO)；江苏省水产三项工程项目(PJ2011—67)。作者简介：胡勇(1987-)，男，硕士研究生，主要从事生物活性物质分离纯化的研究工作。黛食品科技FOODSCIENCEANDTECHNOLOGY2o1缉第38卷第嗍指标【7l。下测定其吸光值；同时并以氧化型谷胱甘肽为标本实验在前期泥鳅降压肽制备工艺研究的准品绘制标准曲线。以肽含量和抑制率的关系曲基础上

7、，对该条件下的水解液进行初步的分离纯线，根据SPSS概率单位法计算ACE抑制肽的半抑化，并研究其各个组分的体外降血压活性及其消制浓度IC化稳定性。1．3．4超滤将泥鳅蛋白水解液按图1方式[10】采用QuixStand~式膜过滤分离系统分成3个组分，其1材料与方法中Mr．>30ku分组最先截留出来，再将滤过液通过1．1材料与试剂1Oku超滤膜，从而将水解液分成UFI(Mr．>30ku)、泥鳅：连云港水产养殖基地；血管紧张素转UF2(IO～30ku)、UF3(Mr．<10ku)3个组分。化酶(ACE1、马尿酰一组氨

8、酰一亮氨酸(HHL，ACE泥鳅蛋白水解液底物)：美国Sigma公司；交联葡聚糖凝胶G一15：对分子质量Solarbio~京索莱宝科技有限公司；碱性内切酶I¨的肽和少量(Alcalase)：诺维信中国生物技术有限公司；胃蛋1r的肽组成)白酶、胰蛋白酶：广州市齐云生物科技有限公司；其他试剂均为国产分析纯。1．2仪器设备ALPHA一4冷冻干燥器：德国CHRIST公司；TGL一16M台式高速冷