苎麻根总黄酮超声提取工艺研究.pdf

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1、湖北中医杂志2014年O8月第36卷第08期HubeiJournalofTCMNO2014．Vof．36．Ⅳ0．08一67一·中药研究·苎麻根总J黄臾酮日I超声提取工艺研究吴尚敏(湖北省黄冈市黄州区脑血管病医院，湖北黄冈438000)关键词：苎麻根；黄酮；超声提取；正交实验中图分类号：R284．2文献标识码：A文章编号：1000—0704(2014)08—0067—03苎麻BoehmeNan∞(Linn．)原产中国，属于荨麻科苎麻属分别准确吸取该标准溶液0、0．5、1．0、1．5、2．0、2．5、3．0mL于植物。李时珍在著名的医学著作《本草纲目

2、》中，对苎麻，特别是10mL容量瓶中，加70％乙醇定容至5mL，加5％亚硝酸钠溶液苎麻根的药用功能作了详细的记载和阐述⋯；在我国台湾被用0．3mL，摇匀静置6min后，加10％硝酸铝溶液0．3mL，摇匀后静作利尿剂、退烧药和护肝药物。苎麻根具有广泛的生物活置6min，再加1mol／L氢氧化钠溶液2mL，混匀，70％乙醇定容至性，Huang和Chang等研究表明引，苎麻根萃取物在体外10mL，静置30min，在500nm下测定其吸光度。以芦丁标准品的HepG22．2．15细胞中和乙肝病毒血症SCID鼠体内均能抑制乙浓度X(mg／mL)为横坐标，以吸

3、光度值Y为纵坐标，绘制标准曲肝病毒活性和产生。“n等研究表明J，苎麻根粗提物具有清除线，回归方程Y=14．339x+0．015，并求相关系数r=0．9997，线性自由基、抗FeCL2一抗坏血酸诱发的脂质过氧化等多种生理作范围：0．005—0．03ms／mL。用。2．2超声提取法单因素实验本研究以苎麻根为原料，对苎麻根中总黄酮的超声提取工(1)提取溶剂浓度对苎麻根总黄酮提取率的影响艺进行研究，采用单因素实验和正交实验对超声提取工艺参数准确称取1g干燥苎麻根粉(8O目)5份，分别加入20mL蒸进行了优化。馏水、30％乙醇溶液、50％乙醇溶液、70％乙

4、醇溶液、90％乙醇溶1仪器与试药液，置于超声提取器(功率600W)中超声处理8rain，用布式漏斗1．1药材抽滤，取滤液备用，将滤液离心5min，离心速率4000rad／s，取出上苎麻根，采自湖北成宁，采后洗净在40℃烘箱中烘干至恒清液，定容至50mL，作为供试品。按标准曲线法进行显色后测试重。将干燥的苎麻麻根粉碎后，过80目筛备用。并计算提取率。1．2主要试剂与仪器(2)提取时间对苎麻根总黄酮提取率的影响主要实验试剂：芦丁对照品购于中国药品生物制品检定所，称取1g干燥苎麻根粉(80目)5份，各加入20mL50％乙醇溶亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、

5、无水乙醇、三氯化铁、醋酐、浓硫液置于超声提取器(功率600W)中分别超声处理2rain、4rain、酸、盐酸镁、醋酸铅、醋酸镁、锌粉、三氯化铝、浓氨水、盐酸、碘化6min、8rain、10min，用布式漏斗抽滤，取滤液备用，将滤液离心秘钾、氯仿、冰醋酸均购自上海实验试剂有限公司。5rain离心速率为4000rad／s，取出上清液，定容至50mL，作为供主要仪器：电子分析天平(CPA225D，Sartofius)，紫外可见分试品。按标准曲线法进行显色后测试并计算提取率。光光度计(UV一1201，北京瑞利公司)，超声波清洗器(sB一(3)提取剂用量对

6、苎麻根总黄酮提取率的影响120D，宁波新芦生物科技股份有限公司)，真空旋转蒸发仪(RE称取1g干燥苎麻根粉(8O目)5份，分别加入5mL、10mL、一52A，上海亚荣生化仪器厂)。15mL、20mL、25mL50％乙醇溶液(提取剂用量分别为5倍、1O倍、2方法与结果15倍、2O倍、25倍)置于超声提取器(功率600W)中超声处理2．1芦丁标准曲线的绘制8min，用布式漏斗抽滤，取滤液备用，将滤液离心5min，离心速率参考文献报道，准确称取芦丁标准品5．0rag，置于50mL为4000rad／s，取出上清液并转移到玻璃试管中，再用50％乙醇溶容量瓶

7、中，用70％乙醇定容，得到0．1mS／mL的芦丁标准溶液，液稀释到50mL备用。按标准曲线法进行显色后测试并计算提一68一湖北中医杂志2014年08月筮鱼鲞箜Q塑取率。由表2显示的结果可见，三个因素的极差大小排序为A>C2．3超声提取法正交实验设计>B，因此，三个因素影响次序为：乙醇浓度>提取剂用量>超声依据前期超声提取苎麻根总黄酮单因素实验的条件，设计波时间。最佳工艺组合为A2B3C3但结合表3进行方差分析可正交实验进一步优化对提取率影响较大的3个因素(提取剂浓知，A因素有显著意义，B因素和c因素没有显著想意义，从节约度、提取时间和提取剂用量倍

8、数)，取三个水平，优选最佳提取工时间和能源的角度考虑，B因素选2，C因素选2比较合适。综合艺条件。因素水平(见表1)。以上分析，最佳提取