PEI介导 VEGFR-3 siRNA 转染对 VEGF-C诱导LEPCs分化的影响-论文.pdf

《PEI介导 VEGFR-3 siRNA 转染对 VEGF-C诱导LEPCs分化的影响-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、齐齐哈尔医学院学报2014年第35卷第16期JournalofOicliharUniversityofMedicine，2014，Vo1．35．No．16·2343·．论著PEI介导VEGFR．3siRNA转染对VEGF—C诱导LEPCs分化的影响陈永春金海峰谢立平王丽芳张梅李坤高喜仁李静平【摘要】目的应用聚乙烯亚胺(polyethyleneimine，PEI)介导淋巴管内皮祖细胞(1ymphaticendothelialprogenitorcells，LEPCs)VEGFR·3基因siRNA，体外沉默LEPCsVEGFR一3基因表达，观察VEGFR一3siRNA

2、对VEGF—C诱导LEPCs分化的影响。方法采用Ficoll法分离人脐血单个核细胞，流式细胞仪、免疫荧光分选并鉴定LEPCs。PEI包裹前期实验抑制效果最好的VEGFR-3siRNA体外转染人LEPCs，荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效率。流式细胞仪检测经VEGF-C诱导7天各组LEPCsCD133细胞所占比例，14天后各组LYVE-1细胞所占比例。结果VEGFR一3siRNA成功转染入LEPCs，转染效率30％，与lipofectimine转染效率无差异，VEGFR一3siRNA转染组7天的LEPCsCD133细胞所占比例明显高于VEGF—C诱导组(P<0．05

3、)，而14天后两组之间LYVE一1细胞所占比例无显著差异(P>0．05)。结论体外经由PEI介导的siRNA能有效的沉默LEPCsVEGFR．3的表达，从而抑制VEGF．C诱导的LEPCs分化。【关键词】淋巴管内皮祖细胞；VEGFR-3；聚乙烯亚胺；siRNA；VEGF—CEffbctofinterferencemediatedbyPEI／ⅦGFR-3siRNAondifferentiationoflymphaticendothelialprogenitorcellafterinductedwith、GF-CC删一chun，eta1．DepartmentofAna

4、tomy，QiqiharMedicalUniversity，Qiqihar，HeiLongfiang161042，China．【Abstract】0bjectiveTostudythegenesilencingeficiencyofsiRNAtargetedagainsthumanVEGFR-3(VEGFR一3siRNA)oflymphaticendothelialprogenitorceils(IJPCs)invitromediatedbyp0lyethyleneimine(PEI)，andtoobservetlleeffectondiferentiationo

5、fLEPCsafterinductedwitllVEGF-C．MethodsThemononuclearcellsofUmbiliealcordbloodwereisolatedusingdensitycentrifugationwithFicoilsolution．LEPCsweresortedandviewedusingflowcytometerandconfocallaserscanningmicroscope．respectively．PEImediatedVEGFR．3siRNAtransfectingLEPCs．Fluorescencemicrosco

6、pyandflowcytometryfortransfectionefficiency．rheexpressionofCD133wasdetectedineachgroupsbyflowcytometerafterinductedwitllVEGF．Cf0r7days．tllesamemet}lodwasusedintheexpressionofLYVE1after14days．ResultsVEGFR．3siRNA／PE1weretransectedtoLEPCs．thetransfectioneficiencywas30％．出erewasnodiference

7、comparedwithlipofectimine．TheexpressionofCD133washigherthancontrolgroupsinductedwithVEGF．C．TheexpressionsofLYVE一1havenodifferencebetweentwogroups．ConclusionsThePEIcouldefectivelytransfectsiRNAintocellsandsilencetheVEGFR．3geneexpressionofLEPCs．thendiferentiationofLEPCswasinhibitedbyVEG

8、FR一3s