水稻OsKAT2基因的克隆及表达分析-论文.pdf

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1、江苏农业学报(Jiangsu0厂Agr，Sci．)，2014，30(4)：691—697http：／／wwW．JsnYXb．COIll69I高南，李俊林，郝东利．水稻OsKAT2基因的克隆及表达分析[J]．江苏农业学报，2014，30(4)：691—697doi：10．3969／j．issn．10004440．2014．04．001水稻OsKAT2基因的克隆及表达分析高南。，李俊林，郝东利(1．中国科学院南京土壤研究所土壤与农业可持续发展国家重点实验室，江苏南京210008；2．南京林业大学森林资源与环境学院，江苏南京210037)摘要：为获得抵抗逆境胁迫的相关基因，利用

2、电子克隆方法从水稻中获得了1个新基因，将其命名为OsKAT2(GenBank登陆号为KJ010541)。生物信息学分析结果表明OsKA72的cDNA序列开放阅读框长1806bp，编码蛋白质由601个氨基酸组成；OsKAT2蛋白质包含K通道的保守结构域，属于Shaker家族第1I组。通过实时定量荧光PCR分析发现，OsKAT2主要在地上部表达；在干旱、高盐和外源脱落酸(ABA)胁迫处理下，水稻地上部OsKA72的表达量均降低。初步推测OsKAT2可能在水稻抵抗逆境胁迫中发挥作用，是一个水稻抗非生物逆境改良的候选基因。关键词：水稻；实时荧光定量PCR；非生物胁迫；钾离子通道中

3、图分类号：S511．035．3文献标识码：A文章编号：10004440(2014)04—0691-07MolecularcloningandexpressionanalysisofOsKAT2inriceGAONan，LIJun-lin一，HAODong—li(1．StateKeylxtboratory0厂SoilandSustainableAgriculture，InstituteofSoilScience，ChineseAcademyD厂Sciences，Nanjing210008，China；2．CollegeofForestResourcesandEnvironm

4、ent，NaForestryUniversity，Nang210008．China)Abstract：Anewgene，designatedOsKA72(GenBankaccessionnumberKJ010541)，wasisolatedfromOrazysati—uabyinsilicocloning．BioinformaticsanalysisshowedthattheopenreadingframeofOsKAT2was1806bpinlengtheneo—ding601amidacidresidues．TheproteinOsKAT2whichcontained

5、KchannelconserveddomainsbelongedtogroupIIoffamilyShaker．Real—timefluorescencequantitativePCR(RT—qPCR)revealedOsKAT2wasLocalizedinshoot．Theexpres—sion1evelsofOsKA72declinedunderdrought．saltandinvitroABAstress．TheresultsindicatedthatOsKAT2mightplayaroleinabiotic—stress—tolerance，andcouldbea

6、candidategeneforriceabiotic—stress—toleranceimprovement．Keywords：Orazysativa；RT—qPCR；abioticstress；potassiumchannel水稻生产过程中时常遇到季节性和区域性的是进行转基因水稻培育的前提。Shaker家族K通干旱、高盐等非生物逆境胁迫，严重影响水稻的产道成员在植物体内的增强表达能提高植物的抗逆量和品质。转基因是提高水稻抗非生物逆境性，例如将水稻的K通道基因OsKAT1转入水稻能力的主要技术措施之一。筛选合适的基因，愈伤组织，转基因水稻愈伤组织的抗盐胁迫能力明显提高。

7、因此，Shaker家族K通道成员是重收稿日期：2014-01-08要的候选基因。Shaker家族成员具有各自独立的基金项目：国家自然科学基金项目(31000930)；国家转基因重大专表达模式J。拟南芥[Arabidopsisthaliana(L．)项基金项目(2009ZX08009—129B)Heynh．]的KAT／基因在叶保卫细胞中表达，KAT2作者简介：高南(1981一)，女，辽宁黑山人，博士，助理研究员，主要基因在叶保卫细胞、叶韧皮部和花中表达。。；玉米从事分子植物营养和植物逆境生理方面的研究。(E-mail)sprin