核桃青皮多酚氧化酶纯化及酶学性质研究

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1、第52卷第19期湖北农业科学Vo1．52No．192013年10月HubeiAgriculturalSciencesOct．．2013核桃青皮多酚氧化酶纯化及酶学性质研究王和利，陈迪新，王洪涛(1．河南科技大学林学院，河南洛阳471003；2．河南大学生命科学学院，河南开封475001)摘要：采用简化的方法对核桃(Juglansre)iaL．)青皮中多酚氧化酶(PP0)进行纯化，并对其酶学性质进行了研究。结果表明，核桃青皮PPO经过丙酮沉淀、金属螯合亲和层析，被纯化了1．42倍．回收率为0．21％以邻苯二酚为底物，该酶最适pH是6．0．最适温度是20q

2、C：抗坏血酸对核桃青皮PPO的活性有很强的抑制作用，亚硫酸氢钠和柠檬酸也能抑制核桃青皮PPO的活性；当Cu。+浓度在0．O1～0．05mmol／L时．Cu“对PPO有激活作用．超过这个范围对PPO活性反而有抑制作用关键词：核桃青皮：多酚氧化酶(PPO)：纯化；性质中图分类号：$664．1；Q55文献标识码：A文章编号：0439—8114(2013)19—4760—04StudiesofPurificationandEnzymaticCharacteristicsofPolyphenolOxidaseinWalnutGreenHusksWANGHe-li

3、，CHENDi-xin，WANGHong-taoz(1．ForestryCollegeofHenanUniversityofScienceandTechnology，Luoyang471003，Henan，China2．CollegeofLifeSciences，HenanUniversity，Kaifeng475001，Henan，China)Abstract：Asimplifiedmethodforpuri~ingpolyphenoloxidasefromwalnut(JuglansiaL．)greenhuskswastested，andthech

4、aracteristicsofpolyphenoloxidasewerestudied．Theresultsshowedthatthepolyphenoloxidase(PPO)ofwalnutgreenhuskswaspurifiedby1．42timeswithacetoneprecipitationandmetalchelateaffinitychromatography．Therecoveryratewas0．21％．Enzymaticcharacteristicswerestudiedwithcatecholassubstrate．Theop

5、timalpHofthewalnutgreenhuskPPOwas6．0，andtheoptimaltemperaturewas20℃；ascorbicacidhadadistinctsuppressioneffectonPPO；sodiumbisulfiteandcitricacidcouldalSOinhibittheactivityofwalnutgreenhuskPPO．CopperioncouldactivatePPOonlyinacertaineoneen—trationrangeofO．01—0．05mmol／L．whileoverthi

6、srange，copperionwouldinhibittheactivityofPPO．Keywords：walnutgreenhusks；polyphenoloxidase；purification；characteristics核桃(．，rejiaL．)又名胡桃，系胡桃科核末端氧化酶．普遍存在于植物体内的非线粒体中桃属植物核桃青皮又被称为青龙衣，是包裹在核新鲜水果、蔬菜容易发生褐变，主要和其体内的多桃外部的一层很厚的绿色果皮⋯在中医中用来治酚氧化酶有关不同来源的PPO分离纯化的方法不疗一些皮肤病l2l和胃神经痛[3]现代该药材被临床同我国的核桃生

7、产量大．核桃青果皮的产生量也用于治疗胃病E4J、子宫疾病以及白细胞减少等，特大．其作为核桃生产中的副产品[8]大部分都被扔掉．别是抗肿瘤的作用比较显著E6J。其色素水溶性好，如果能够加以利用．不仅充分利用了资源．而且也安全无毒害．可以用来提取食用色素．且成本也不减少了对环境的污染．同时还能够增加果农的收古r7]入已有研究对核桃青果皮中的胡桃醌进行了研同o多酚氧化酶(polyphenoloxidase，PPO)是一种究Eg-n]本试验对核桃青皮中的PPO进行分离纯化收稿日期：2013一O1—25基金项目：河南省科技计划重点科技攻关项目(1121021l0

8、020)；河南省科技厅工业攻关项目(112102210298)；河南省教育厅自然科学研究计划项