地塞米松对顺铂诱导人肺腺癌细胞株凋亡的抑制作用及其机制-论文.pdf

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1、四川大学学医学版di)2013；44(6)：902-906JSichuanUniv(MedSciEd)’地塞米松对顺铂诱导人肺腺癌细胞株凋亡的抑制作用及其机制*曹菲，张智慧△，吴萍，李力，黄建鸣四JII省肿瘤医院肿瘤内科(成都610041)【摘要】目的研究地塞米松(Dex)对顺铂(CDDP)引起的人肺腺癌细胞株SPCA／I凋亡的抑制作用及其分子机制探讨。方法体外培养SPCA／I细胞，分别加入不同浓度Dex培养24h后，加人不同浓度CDDP继续培养48h，采用二甲基溴化四氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率；流式细胞仪检测细胞凋亡；用1／,mo

2、l／IDex刺激SPCA／I细胞，分别于lh、2h、4h、6h、12h采用RT—PCR技术，检测SPCA／I细胞中糖皮质激素诱导的蛋白激酶1基因(SGK一1)和丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶l(MKP—1)基因的表达；用生物素标记的抗糖皮质激素受体(GR)抗体对SPCA／I细胞中GR行细胞免疫组化检测。结果sPcA／I细胞经Dex刺激后，对CDDP所致的抑制细胞生长和凋亡呈抵抗作用(P<0．05)。Dex刺激后的SPCA／1细胞表达SGK一1上调，在12h时表达达高峰，未检测到MKP一1表达；细胞免疫组化显示SPCA／I细胞经Dex刺激后GR表

3、达上调，细胞内GR数目高于对照组(P<0．05)。结论体外实验结果表明，Dex对CDDP引起的SPCA／I细胞凋亡有抑制作用。其分子机理可能是通过上调细胞内GR数目，增强通路下游SGK1的表达，从而产生抗凋亡作用。【关键词】地塞米松肺癌顺铂凋亡PreliminaryStudyofApoptoticInhibitionandItsMolecularMechanismofDexamethasoneonCisplatin—inducedHumanLungAdenocarcinomaCellLineSPCA／ICA0Fei，ZHANGZhi—hu

4、i，UPing，LILi，HUANGJiang—ming．DepartmentoJ’MedicalOncology，SichuanProvincialCancerHospitalandInstitute，Chengdu61004l，China△Correspondingauthor，E—mai1：13881889731@139．com[Abstract]ObjectiveTostudytheapoptoticinhibitionanditsmolecularmechanismofdexamethasone(Dex)oncisplatin(

5、CDDP)一inducedhuman1ungadenoearcinomacells．MethodsThehumanlungadenocarcinomacellline，SPCA／I，waspre-culturedinvitrofor24hourswithDexindifferentconcentrationandthendifferentconcentrationofCDDPwasadded．Thecellswereculturedforanother48hours．Thesurviva1rateofthecellswasdetermin

6、edbyMTTcolorimetry．TheappototicrateofSPCA／Icellsmeasuredbyflowcytometer．Usinglumol／IDextostimulatetheSPCA／IcellsRNAsofthecellsatdifferenttimepoints(1h，2h，4h，6h，12h)wereextractedrespective1y．Semi—quantitativeRT_PCRtechnologywasusedtodetecttheexpressionoftheserumandglucocor

7、ticoid—inducedkinase(SGK一1)andmitogen—activatedproteinkinasephosphatase一1(MKP一1)inSPCA／Icells．Simultaneouslytheglucocorticoidreceptor(GR)oftheSPCA／Icelllinecellsweremeasuredbyusingbiotin-labeledanti—glucocorticoidreceptorantibodywithimmunohistochemistryassay．ResultsSPCA／I

8、cellsshowedresistancetoCDDP—。inducedapoptosiswhilepre—。culturedwithDexandtheresistanceintensityw