地塞米松对顺铂诱导人肺腺癌细胞SPC—A1凋亡的抑制作用及分子机制-论文.pdf

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1、第3l卷第3期生物医学工程学杂志V0I．3lNo．32014年6月JournalofBiomedicalEngineeringJune2014地塞米松对顺铂诱导人肺腺癌细胞SPC—A1凋亡的抑制作用及分子机制曹菲张智慧1(成都市西区医院肿瘤科，成都610036)2(四川省肿瘤医院肿瘤内科，成都610041)摘要：研究地塞米松(DEX)对顺铂(cDDP)引起的人肺腺癌细胞SPC—A1凋亡的抑制作用及可能的分子机制。将不同浓度的DEX分别加入人肺腺癌细胞SPC—Al体外诱导培养24h后，再用不同浓度CDDP处理

2、SPC—A1细胞48h。MTT法检测细胞存活率；RT—PCR方法检测1tmol／IDEX诱导培养不同时间后SPC—A1细胞内血清／糖皮质激素一诱导激酶(SGK一1)和有丝分裂原蛋白激酶(MKP一1)的表达；用生物素标记的抗糖皮质激素受体(GR)抗体对SPC—A1细胞行免疫组化染色来检测GR的表达。MTT测定结果显示，SPC—A1细胞经DEX诱导后，对CDDP所致的凋亡有抵抗作用并与DEX浓度呈剂量依赖关系。RT—PCR检测到DEX诱导培养能提高SGK—l在SPC—A1细胞中的表达，表达量随时间延长而增加；但

3、未检测到MKP一1的表达。免疫组化检测显示SPC—A1细胞经DEX诱导后GR上调，细胞内GR表达的阳性细胞数明显高于对照组。结果表明DEX对CDDP引起SPC—A1细胞的凋亡有抑制作用。可能的分子机制是通过上调细胞内GR表达，进而上调其通路下游抗凋亡蛋白SGK一1的表达，导致SPC—Al细胞产生抗凋亡作用。关键词：地塞米松；糖皮质激素受体；肺癌；化疗；抗凋亡中图分类号R73—36文献标志码ADOI：10．7507／1OO卜55l5．20140122TheInhibitoryEffectsofDexameth

4、asoneonCisplatinInducedApoptosisofHumanLungAdenocarcinomaCellSPC—A1andItsMolecularMechanismCAoFeiZHANGZhihui1(Departmento_，Ontology，ChengduWesternHospital，Chengdu610036，China)2(Department0，MedicalOmology，SichuanProvincialTumorHospital，Chengdu610041，China)A

5、bstract：Theaimofthisstudyistoinvestigatetheapoptoticinhibitionanditsmolecularmechanismofdexametha—sone(DEX)actingoncisplatin(CDDP)一inducedapoptosisofhumanlungadenocarcinomacellSPC—A1．SPC—A1ceilswerepre—culturedinvitrofor24hourswithDEXindifferentconcentrati

6、onsandthenCDDPwasaddedindifferentconcentrationsforculturingforfurther48hours。ThesurvivalratesofthecellsweredeterminedbyMTT．Theex—pressionofserum／glucocorticoid—inducedkinase(SGK一1)andmitogen—activatedproteinkinasephosphatase一1(MKP一1)inSPC—A1ceilsa{terbeing

7、culturedby1~mol／IDEXatdifferenttimewasdetectedbysemi—quantitativeRT～PCRtechnology．Theexpressionofglucocorticoidreceptor(GR)inSPC—A1cellswasmeasuredbyimmunohisto—chemistry(IHC)withbiotin—labeledanti—GR．TheresultsofMTTshowedthatSPC—AlcellshadresistancetoCDDP

8、inducedapoptosiswithpre—culturedDEXandtheresistanceintensitypresentedDEXconcentration-dependent．TheexpressingquantityofSGK一1inSPC—A1cellsstimulatedbyDEXcouldbeelevatedandincreasedwithintentionoftime．buttheexp