用适配体修饰纳米金做共振瑞利散射光谱探针检测妥布霉素.pdf

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1、第３４卷，第９期光谱学与光谱分析Vol畅３４，No畅９，pp２４８１‐２４８４２０１４年９月SpectroscopyandSpectralAnalysisSeptember，２０１４用适配体修饰纳米金做共振瑞利散射光谱探针检测妥布霉素倡倡马璐，温桂清，刘庆业，梁爱惠，蒋治良广西师范大学，珍稀濒危动植物生态与环境保护省部共建教育部重点实验室，广西桂林　５４１００４摘要用硼氢化钠还原氯金酸制备了金纳米粒子（GN），用妥布霉素适配体（Apt）修饰GN可获得较稳定的Apt‐GN探针。在pH６畅８Na２HPO４‐NaH２PO４（PBS）缓冲液及NaCl存在下，Apt‐GN

2、探针稳定而不聚集；当有妥布霉素（Tbc）存在时，它与Apt‐GN探针中的Apt特异性结合并释放出纳米金，纳米金在NaCl作用下聚集，导致体系在３６８nm处的共振瑞利散射光增强。在选定实验条件下，３６８nm处的共振散射峰强度的－１增大值ΔI与抗生素妥布霉素（Tbc）浓度在１畅９～５８畅３ng·mL范围内呈良好线性关系，其线性回归方程为－１－１ΔI＝３５畅３c－２３，检出限为０畅８ng·mL妥布霉素。分别对１０畅０，２０畅０和３０畅０ng·mLTbc平行测定５－１次，求得其相对标准偏差分别为６畅８％，５畅０％和４畅４％。考察了共存离子对测定３８畅９ng·mL妥布霉素

3、的２＋２＋２＋２＋干扰情况。结果表明，当相对误差在±１０％以内，８０倍Zn；４０倍L‐谷氨酸，Cu，Mg，Ca；２０倍葡萄糖、盐酸土霉素；１０倍L‐苯丙氨酸、甘氨酸；２倍L‐天冬氨酸；６倍HSA和BSA不干扰测定。这说明本方法具有较好的选择性。该法用于分析测定妥布霉素滴眼液中的妥布霉素含量，结果令人满意，相对标准偏差在６畅５％～７畅６％之间，回收率在９５畅０％～１０７％之间。关键词妥布霉素；适配体；金纳米粒子；共振瑞利散射中图分类号：O６５７畅３　　文献标识码：ADOI：１０畅３９６４／j畅issn畅１０００‐０５９３（２０１４）０９‐２４８１‐０４［１２］子。

4、Zhu等基于氨基糖苷类抗生素‐卡那霉素与适配体／多引言聚DPB（AuNPs）／SPE传感探针中的适配体特异性结合，导致电流线性降低，已成功用于检测实际样品中的卡那霉素。氨基糖苷类抗生素（AG，如妥布霉素）是常用的抗感染共振瑞利散射光谱法是一种灵敏、快速、简便的光谱分药物，具有水溶性好、性质稳定、抗菌谱广等特点。它通过析新技术，在生物化学、分析化学、纳米材料研究等方面均［１３‐１５］－１与细菌核糖体不可逆结合，抑制细菌蛋白质的合成，主要用有应用，并用于１畅７ng·mL盐酸氯丙嗪、２ng·［１］－１［１６，１７］于预防与治疗人类和动物的疾病。但随着此类抗生素广泛mL

5、维生素B１２等药物分析。金纳米粒子具有较好的［２］而大量地使用，细菌对抗生素逐渐产生了耐药性。此外，生物相容性和共振瑞利散射效应，在适配体分析和共振瑞利［１５］滥用AG还会产生很严重的副作用，其中耳毒性和肾毒性最散射光谱分析已有应用。据我们所知，有关适配体修饰纳［３］为显著。食物中超标的AG也会危害人体健康，在动物饲米金共振瑞利散射光谱法检测妥布霉素的工作尚未见报道。养过程中应严格控制给药量和时间。因此，快速准确地检测本工作基于纳米金与适配体的高亲和力，制备Apt‐GN探食物药品中AG含量对人体健康具有重要意义。目前，AG针，将纳米金适配体探针与特异性适配体反应

6、和聚集纳米金［４］［５］的分析方法主要有比色法，电化学法、高效液相色谱的共振瑞利散射效应结合起来，建立了测定妥布霉素的适配［６］［７］法、毛细管电泳法等。核酸适配体是通过指数富集配体体修饰纳米金共振瑞利散射光谱法。系统进化（SELEX）从体外DNA／RNA库筛选得到的核苷酸［８］序列。在实际应用中，适配体比传统识别分子即抗体显示１　实验部分出更多的优点，如易于体外合成、稳定性好、易于修饰，靶向性高、高选择性等。近年来，适配体作为生物探针已被广1畅1仪器和试剂［９］［１０］［１１］泛应用于检测蛋白质、金属离子、小分子等目标分F‐７０００日立荧光光谱仪（日本Hita

7、chi公司）；F９５S荧光收稿日期：２０１３‐０９‐０１，修订日期：２０１４‐０１‐１５基金项目：国家自然科学基金项目（２１３６７００５，２１２６７００４，２１１６５００５）和广西自然科学基金项目（２０１３GXNSFFA０１９００３）资助作者简介：马璐，１９８８年生，广西师范大学硕士研究生e‐mail：３７３１０７６３９＠qq．com倡通讯联系人e‐mail：zljiang＠mailbox畅gxnu畅edu畅cn；ahliang２００８＠１６３畅com２８４２光谱学与光谱分析第３４卷分光光度计（中国上海光学仪器厂）；TU‐１９０１型双光束紫结合形成较稳定的Apt

8、‐GN复合物，其共振散射