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1、中华检验医学杂志2004年3月第27卷第3期 ChinJLabMed,March2004,Vol27,No.3·205··继续教育园地·血细胞分析仪检测原理乐家新 周建山 兰亚婷 传统的血细胞检查完全采用手工方法,不仅操作繁琐费法及过程。时,而且由于多种原因,计数结果的准确性和精密度难以保目前,许多仪器除给出细胞数外,还同时提供可以表示证。1958年,库尔特采用电阻率变化与电子技术相结合的细胞群体分布情况的图形———直方图。可显示出某一特定方法,发明了性能比较稳定的电阻抗法血细胞计数仪,开创细胞群的平均细胞体积、细
2、胞分布情况和是否存在明显的异了血细胞分析的新纪元。20世纪90年代以来,随着各种高常细胞群,由脉冲累积得到。如图2所示,左图为示波器显新技术在血细胞分析仪中的应用,使其检测原理不断完善,示的所分析细胞的脉冲大小,右图为相应的体积分布直方检测水平不断提高,测量参数不断增加,各种类型的血细胞图,横坐标为体积,纵坐标为相对数量。分析仪已在国内外各医院广泛使用。但从根本上讲,其检测在进行白细胞分析时,仪器将体积范围从35～450fl分原理大致分为两部分,即电阻抗法与光散射法。为256个通道,每个通道约为1164fl,并将每个
3、白细胞的脉一、电阻抗法血细胞分析技术冲根据其体积大小分类并储存在相应的体积通道中。再由(一)电阻抗法白细胞计数和分类原理计算机拟合成一条平滑曲线,从而得到白细胞体积分布直方电阻抗法白细胞计数原理是根据血细胞非传导性的性图(见图3),其纵坐标表示白细胞的相对数量(RELNo1),横质,以对电解质溶液中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电坐标表示白细胞体积(单位:fl)。阻变化进行检测为基础,进行白细胞计数和体积测定。在等电阻抗法得到的白细胞分类值是根据各群细胞在白细渗电解质溶液(稀释液)中,有一个用于细胞计数的小孔管,胞直
4、方图上所占面积的大小计算得来的(见图4)。白细胞其内侧充满了稀释液,并有一个内电极,其外侧细胞悬液(稀计数池中除加入一定量的稀释液外还加入了溶血剂,此溶血释液)中有一个外电极,小孔两侧的电极之间有稳定的电流。剂一方面使红细胞溶解;另一方面使白细胞浆经胞膜渗出,细胞为相对不良导体,其导电性质比稀释液低,当有一个细胞膜紧裹在细胞核或存在的颗粒周围,使白细胞成为“膜包胞通过小孔时,于瞬间引起了电压变化而出现一个脉冲信核”。仪器将体积在35～450fl的这种颗粒认定为白细胞,并号。脉冲的数量与细胞的数量成正比,脉冲的高度与细
5、胞的根据其体积大小在直方图上从左至右初步确认其相应的三体积成正比。脉冲信号经放大、阈值调节、甄别、整形后,送个细胞群。在正常白细胞直方图上,小细胞群是位于左侧又入计数系统进行处理,得出被测细胞的数量。图1显示出血高又陡的峰,分布在35～90fl范围,以成熟淋巴细胞(LYM)细胞计数仪应用电阻抗原理进行细胞计数及体积分析的方为主要特征细胞;大细胞群是位于右侧较低且分布宽的峰,图1 细胞计数电阻抗原理作者单位:100853北京,解放军总医院临床检验科©1995-2004TsinghuaTongfangOpticalDis
6、cCo.,Ltd.Allrightsreserved.·206·中华检验医学杂志2004年3月第27卷第3期 ChinJLabMed,March2004,Vol27,No.3跨越160～450fl,以中性粒细胞为主要特征细胞;位于大、小细胞的体积。脉冲高度叠加,经换算即可得HCT。有的仪细胞群之间的较平坦的区域,分布在90～160fl范围,是单个器先以单个细胞高度计算出红细胞平均体积(MCV),再乘核细胞(MONO),也被称为中间细胞(MID),以单核细胞为以红细胞数,得出HCT。仪器根据所测单个细胞体积及相主要特征
7、细胞。仪器根据各细胞群占总体的比例计算出相同体积细胞占总体的比例,可打印出红细胞体积分布直方应的百分比,如果与该标本的白细胞总数相乘,即得到各类图。细胞的绝对值。尽管计数红细胞的血样中含有白细胞,但由于正常血液中红细胞∶白细胞约为750∶1,故白细胞因素可忽略不计。在某些病理情况下(如白血病),白细胞数明显增加而又伴严重贫血时,可使所得红细胞各项参数产生明显误差,需要校正后方可发出检验报告。21血红蛋白测定原理:在稀释的血液中加入溶血剂后,红细胞被溶解,释放出血红蛋白(Hb),后者与溶血剂中有关成分结合形成Hb衍生物
8、,进入Hb测试系统,在特定波长(一般在530～550nm)下比色,吸光度的变化与液体中Hb图2 脉冲信号与直方图的关系含量成正比,仪器便可显示其浓度。不同系列血细胞分析仪配套溶血剂配方不同,形成的Hb衍生物亦不同,其吸收光谱各异但最大吸收均接近540nm。校正仪器必须以HiCN值为标准。大多数系列血细胞分析仪溶血剂内均含有氰化钾,与Hb作用后形
