CHD5基因与雌激素受体阴性乳腺癌相关因子的研究.pdf

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1、第35卷第4期吉林医药学院学报Vo1．35No．42014年08月JournalofJilinMedicalCollegeAug．2014—241一文章编号：1673-2995(2014)04-0241-06·论著·CHD5基因与雌激素受体阴性乳腺癌相关因子的研究王白石，李东阳。，崔桂花，罗速(1．天津医科大学中新生态城医院检验科，天津300467；2．天津市泰达医院检验科，天津300457；3．吉林医药学院药学院，吉林吉林132013；4．北华大学基础医学院，吉林吉林132013)摘要：目的比较正常乳腺细胞HBL-100与雌激素受体阴性乳腺癌细胞MDA．MB-231中CH

2、D5表达水平。初步探讨CHD5基因与雌激素受体阴性乳腺癌发生发展的相互关系及分子机制。方法应用RT．PCR法检测CHD5基因在HBL一100细胞和MDA—MB-231细胞中含量的差异；设计合成靶向CHD5的小干扰序列，构建RNA干扰质粒pRNAT—U6．1／Neo-CHD5，抑制CHD5基因的表达，并检测乳腺癌相关基因HER．2的表达情况。结果CHD5基因在HBL一100中高表达，在MDA—MB·231中低表达。酶切鉴定、DNA测序证实表达质粒构建成功，无碱基突变。重组载体能干扰HBL-100细胞CHD5基因的表达。干扰后，HBL．100细胞中CHD5表达被抑制，HER-2

3、表达升高，呈负相关性。结论CHD5的缺失或低表达可能与雌激素受体阴性乳腺癌的发生发展有关，为CHD5基因可能成为雌激素受体阴性乳腺癌治疗的新靶点提供理论依据。关键词：小干扰RNA；CHD5；人表皮生长因子受体-2；雌激素受体阴性乳腺癌细胞系MDA．MB-231：人正常乳腺细胞系HBL．100；基因沉默中图分类号：R737．9文献标识码：AResearchofCHD5geneandestrogenreceptornegativebreastcancerrelat．edfactorsWANGBai—shi，LIDong—yang，CUIGui—hua。，LUOSu(1．Depa

4、rtmentofLaboratory。theSino。SingaporeEco．cityHospitalofTianjinMedicalUniversity，Tianjin，300467；2．DepartmentofLaboratory，TianjinTEDAHospital，Tianjin，300457；3．JilinMedicalCollege，JilinCity，JilinProvince，132013；4．BeihuaUniversity，JilinCity，JilinProv—ince，132013，China)Abstract：ObjectiveTocompar

5、etheexpressionofCHD5betweennormalmammaryglandularcellHBL．100andestrogenreceptornegativebreastcancercellDA．MB一231．anddiscusstherelationshipandmoleculemechanismbe．tweenCHD5geneandestrogenreceptornegativebreastcancerinitially．MethodsComparetheexpressionofCHD5betweenNormalcellHBL-100andestroge

6、nreceptornegativebreastcancercellMDA．MB_231byusingRT—PCR．De．signandsynthesizethesiRNAtargetingCHD5．andproducepRNAT—U6．1／Neo-CHD5plasmidwhichsuppressingtheexpressionofCHD5．MeasuretheexpressinglevelofrelevantestrogenreceptorHER．2inthecellHBL．100atthesametime．ResultsDNAsequencingshowedthatthe

7、recombinantvectorpRNAT．U6．1／Neo．CHD5wassuccessful—lyconstructedwithoutanybasemutation．TheplasmidpRNAT．U6．1／Neo．CHD5couldeficientlyreducetheexpres．sionofCHD5．CHD5geneexpressionwasinhibitedinHBL一100cells．andtheexpressionleveloftherelevantfactorHER一2stepsup．Concl