AMPK信号通路在七氟醚预处理增强大鼠心肌细胞缺氧复氧时抗氧化能力中的作用.pdf

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1、746中华麻醉学杂志2014年6月第34卷第6期ChinJAnesthesiol，June2014，Vo1．34，No．6·重症医学·AMPK信号通路在七氟醚预处理增强大鼠心肌细胞缺氧复氧时抗氧化能力中的作用赵建力焦丽媛张彦清王峰李耀李静静李博刘保江【摘要】目的探讨单磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMPK)信号通路在七氟醚预处理增强大鼠心肌细胞缺氧复氧时抗氧化能力中的作用。方法采用随机数字表法，将大鼠胚胎心肌细胞(H9C2细胞)分为3组(n=12)：对照组(C组)、缺氧复氧损伤组(H／R组)和七氟醚预处理(sP组)；采用随机数字表法，将AMPK基因敲除(AMPKsiRNA)的H9C2细胞分为3

2、组(n=12)：对照组(A—C组)、缺氧复氧损伤组(A—H／R组)和七氟醚预处理(A．sP组)。H9C2细胞置于95％N，+5％C02培养箱孵育14h，之后置于95％0：+5％CO培养箱中孵育3h，建立缺氧复氧模型。sP组H9C2细胞培养液中加入七氟醚，终浓度为2．0mmol／L，每次孵育15min，共3次，间隔15min进行七氟醚预处理。七氟醚预处理结束后15min建立缺氧复氧模型。复氧3h时，采用lucigenin增强化学发光法和DHE染色测定超氧阴离子水平，并测定LDH释放量和cagpase一3活性。结果与c组比较，H／R组和sP组H9C2细胞LDH释放量增多，caspase一3

3、活性增强，超氧阴离子水平升高(P<0．O1)；与H／R组比较，sP组H9C2细胞LDH释放量减少，easpase．3活性减弱，超氧阴离子水平降低，A．H／R组H9C2细胞LDH释放量增多，caspage．3活性增强，超氧阴离子水平升高(P<0．01)；与sP组比较，A—sP组H9C2细胞LDH释放量增多，caspase一3活性增强，超氧阴离子水平升高(P<0．01)；与A—H／R组比较，A—sP组H9C2细胞LDH释放量减少，caspase一3活性减弱，超氧阴离子水平降低(P<0．O1)。结论AMPK信号通路参与了七氟醚预处理增强大鼠心肌细胞缺氧复氧时的抗氧化能力，但并未起主要作用。【

4、关键词】蛋白激酶类；麻醉药，吸入；心肌再灌注损伤；抗氧化剂；缺血预处理RoleofAMPKsignalingpathwayinsevofluranepreconditioning-inducedenhancementofantioxidantcapacityduringhypoxia-reoxygenationincardiomyocytesofratsZhaoJianli，JiaoLiyuan，ZhangYanqing，Wangng，LiYao，LiJingfing，LiBo，LiuBaojiang．DepartmentofAnesthesiology，FimtHospitalofS

5、hanxiMedicalUniversity，Taiyuan030001，ChinaCorrespondingauthor：LiuBaojiang．Email：baojiangliu@163．com【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheroleof5'-AMP．activatedprotein(AMPK)signalingpathwayinsevofluranepreconditioning—inducedenhancementofantioxidantcapacityduringhypoxia—reoxygenation(H／R)inthecardio

6、myocytesoftherats．MethodsTheratembryoniccardiomyocytes(H9C2cells)wererandomlydividedinto3groups(n=12each)usingarandomnumbertable：controlgroup(groupC)，H／Rgroup，andsevofluranepreconditioninggroup(groupSP)．AMPKgeneknockout(AMPKsiRNA)H9C2cellswererandgmlydividedinto3groups(n：12each)usingarandomnumbe

7、rtable：controlgroup(groupA—C)，A—H／Rgroup，andsevofluranepreconditioninggroup(groupA-SP)．Thecellswereexposedto95％N2+5％CO2inanincubatorfor14hfollowedbyreoxygenationwith95％O2+5％CO2for3h．InSPgroup，thecellswerepreconditionedwith15