一种新型多元均相时间分辨荧光免疫分析方法的建立.pdf

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1、第35卷第4期湖北大学学报(自然科学版)VoL35No．42013年12月JournalofHubeiUniversity(NaturalScience)Dec．，2013文章编号：1000—2375(2013)04—0474—06一种新型多元均相时间分辨荧光免疫分析方法的建立陈振华，陈玫君，侯经远，郑洁纯，吴英松，刘天才(1．南方医科大学生物技术学院，广东广州510515；2．南方医科大学公共卫生与热带医学学院，广东广州510515)摘要制备出具有光学特异性的3种不同颜色量子点纳米微球和铽螯合物，分别与CEA、AFP和HBsAg的两株抗体偶联，采用双抗体夹心法模式，充分利用两株抗体与抗原的

2、相互作用，通过采集不同量子点发出的荧光信号，根据其信号的强弱判定标记在量子点纳米微球上的抗体结合的抗原的量，从而实现多元待分析物的定性定量分析．结果表明，量子点的荧光信号与CEA、AFP和HBsAg抗原浓度呈线性关系，其函数分别为：lgY一2．79173+0．915841gX(R一0．99808)、lgY一3．69543+0．456441gX(R=0．99848)和lgY一4．12898+0．409451gX(R=0．99845)，分析灵敏度分别为：0．44、0．24和0．02ng／mL．关键词多元均相免疫分析；时间分辨荧光免疫分析；双抗体夹心法；荧光共振能量转移；量子点中图分类号R446．

3、1文献标志码ADOI：10．3969／)．issn．1000—2375．2013．04．016Anovelhomogeneoustime-resolvedmultiplexedfluoro-immunoassaysCHENZhenhua，CHENMeijun，HOUJingyuan，ZHENGJiechun2，WUYingsong，LIUTiancai(1．SchoolofBiotechnology，SouthernMedicalUniversity，Guangzhou510515，China；2．SchoolofPublicHealthandTropicalMedicine，Souther

4、nMedicalUniversity，Guangzhou510515，China)AbstractThreekindsofquantumdotsnanoparticlesandterbiumchelateswere。respectively。preparedwithnovelopticalproperties．Theywereconjugatedwithtwomonoclonalantibodiesrespectively．Thenwithdoubleantibodiessandwichassay，themechanismoftime-resolvedfluoresceresonanceen

5、ergytransferwasmainlyinvestigatedbyinteractionsbetweentwomonoclonalantibodiesandtheircorrespondingantigens．Detemlinedtheamountofantigenscapturedbyantibodiesbasedonthefluorescencesign~fromdiferentquantumdots，inordertoachievequalitativeandquantitativeanalysisofmultiplexobjectseresultshowedthatthesign

6、alshadlinearcorelationwiththeconcentrationofantigensandtheycouldbedescribedasthefollowingmodels：lgY=2．79173+0．915841gX(R—O．99808)，1gY=3．69543+0．456441gX(R=0．99848)andlgY一4．12898+0．409451gX(R一0．99845)，theanalyticalsensitivitieswere0．44，0．24，and0．02ng／mkKeywordshomogenousmultiplecompleximmunoassay；ti

7、me-resolvedfluorescenceimmunoassay；double-antibodysandwichmethod；fluorescenceresonanceenergytransfer；quantumdot0引言现代免疫分析方法最早的形式是放射免疫分析法，但该法最大的缺陷是其带来的放射性污染对实验人员和环境有很大危害，因此现代免疫分析中采用放射性同位素作为标记物的方法所占的比例正在收稿日期：2