原发性肝癌组织中GP73蛋白的表达-论文.pdf

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1、·234·广东医学2014年1月第35卷第2期GuangdongMedicalJournalJan．2014，Vo1．35，No．2原发性肝癌组织中GP73蛋白的表达叶佩灵，何欣欣，吴晓蔓广州医科大学附属第二医院检验科(广州510260)；中山大学孙逸仙纪念医院病理科(广州510120)【摘要】目的研究GP73在原发性肝癌组织的表达及其意义。方法采用免疫组化二步法检测26例原发性肝癌组织、23例癌旁组织、5例肝硬化肝组织和6例正常肝组织的GP73蛋白的表达。结果GP73在肝癌组织和癌旁组织中表达阳性，阳性率明显高于肝硬化肝组织和正常肝组织(P<0．05)；肝癌纽织与癌旁组织的阳

2、性率差异无统计学意义(P>0．05)；肝硬化肝组织与正常肝组织的阳性率比较差异无统计学意义(P>0．05)；肝细胞肝癌组织与胆管细胞型肝癌组织的阳性率比较差异无统计学意义(P>0．05)。结论GP73蛋白可作为一种有意义的肝癌组织病理标志物，为肝癌的诊断提供标志性的蛋白标记。【关键词】高尔基体糖蛋白73；原发性肝癌；免疫组织化学原发性肝癌(primaryhepaticcarcinoma，PHC)是目司，其余相关试剂及耗材均购自北京中杉金桥生物技术前世界上最常见的消化系统恶性肿瘤之一，病死率高，公司。采用免疫组化二步法，原理是间接法。取新鲜组在我国病死率为45％～50％。及早诊断

3、并及时治织块置10％甲醛溶液中固定，石蜡包埋后，制成4txm疗对提高患者的生存率至关重要。原发性肝癌由血清厚连续切片，步骤：(1)石蜡切片用二甲苯脱蜡，置于学检查和影像学结果作出临床诊断，以病理诊断确诊。梯度酒精各洗5min，脱蜡后自来水冲洗数分钟，PBSPHC标志物的检测对PHC的诊断、治疗和预后都有十浸洗3次；(2)置于EDTApH：9．0抗原修复液用微波分积极的意义。高尔基体糖蛋白73(Golgiprotein，GP73)炉修复抗原后，静置30rain至室温，PBS浸洗3次；(3)是近年发现的存在于高尔基体的一种跨膜蛋白，研究3％H，0，去离子水孵育10min，PBS浸洗

4、3次；(4)滴表明GP73在发生病变的肝细胞中表达明显升高。加一抗(兔抗人GP73多克隆抗体)，37~C烤箱孵育1h，本研究应用免疫组化二步法检测肝癌组织中GP73的PBS浸洗3次；(5)滴)Ju-抗(辣根过氧化物酶标记羊表达情况，以阐明其在诊断原发性肝癌中的价值。抗兔IgG)，37℃烤箱孵育40min，PBS浸洗3次；(6)1资料与方法DAB显色液显色；(7)自来水充分冲洗后苏木素复染、脱水、中性树胶封片。PBS代替一抗作阴性对照。1．1一般资料收集了2012年6—12月中山大学孙显微镜观察结果，GP73阳性细胞为细胞质内出现逸仙纪念医院手术切除并经病理证实为原发性肝癌的黄色

5、、棕黄色或棕褐色着色颗粒。阳性细胞百分数≤26例肝组织石蜡样本，均符合2011年版《原发性肝癌10％为0分，11％～50％为1分，51％～75％为2分，≥诊疗规范》关于原发性肝癌的诊断标准，其中肝细胞76％为3分；细胞质染色无色为0分，黄色为1分，棕肝癌组织14例、胆管细胞型肝癌组织12例，术前均未黄色为2分，棕褐色为3分。两项记分相加：0～1分为进行抗肿瘤治疗；癌旁组织23例(距离肝癌组织2ClTI阴性，t>2分为阳性，4～6分为强阳性。以内，镜下未见癌细胞)；肝硬化肝组织5例，取自部分1．3统计学方法应用SPSS17．0统计软件，采用秩肝脏切除手术患者的肝组织；正常肝脏组织

6、6例，取自和检验、’C检验、FisherS精确概率检验。外伤性肝破裂的肝组织。全部组织样本用石蜡保存。所有患者术前均签署知情同意书，符合医学伦理学规2结果定。各组一般资料比较差异无统计学意义(P>0．05)，2．1GI'73在肝癌组织、癌旁组织、肝硬化肝组织和正具有可比性。见表1。常肝组织的表达情况在肝癌组织、癌旁组织、肝硬化肝组织细胞中GP73蛋白表达主要位于细胞质，呈黄表1各组一般资料比较色、棕黄色或黄褐色颗粒状染色。见图1。2．2不同组织中GP73的阳性率比较肝癌组织、癌旁组织、肝硬化肝组织和正常肝组织的GP73阳性率分别为92．3％(24／26)、91．3％(21／23

7、)、40％(2／5)、33．3％(2／6)。肝癌组织和癌旁组织GP73表达的阳性率显著高于肝硬化肝组织和正常肝组织的阳性率(P<0．05)；肝癌组织与癌旁组织的阳性率差异无统1．2检测方法GP73多克隆抗体购于英国Abcam公计学意义(P>0．05)；肝硬化肝组织的阳性率与正常△通信作者肝组织的阳性率比较差异无统计学意义(P>0．05)。·236·广东医学2014年1月第35卷第2期GuangdongMedicalJournalJan．2014，Vo1．35，No．2人体肝硬化肝组织和正常人