Na2SO4双水相萃取木瓜蛋白酶的研究-论文.pdf

《Na2SO4双水相萃取木瓜蛋白酶的研究-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、食品-II斜妓讲究与摆讨S咒andTechnologyofFoodIndustryPEG／Na2so4~]t水相萃取木瓜蛋白酶的研究王伟涛，张海德，蒋志国，董安华，许英豪，彭健，王斐(海南大学食品学院，海南海口570228)摘要：采用聚乙二醇(PEG)，硫酸钠(Na2SO)双水相体系对木瓜蛋白酶进行分离提取。考察各成相试剂及pH对木瓜蛋白酶活性的影响，研究体系中不同相对分子量PEG、硫酸钠和PEG的质量分数、pH、酶添加量等因素对木瓜蛋白酶在两相体系中分配行为的影响，采用响应面法优化双水相萃取木瓜蛋白酶的最佳分离条件，并进行了实验室规

2、模的放大。结果表明：NazSO的质量分数对分配行为的影响极显著，其次是PEG的质量分数，pN对分配行为的影响不显著。当两相体系中PEG的相对分子量为6000，质量分数为16．0％、Na2SO质量分数为18．O％、pH7．0、酶添加量为1．0mg／g时，木瓜蛋白酶在两相体系中的分配系数最高可达3．1，可获得木瓜蛋白酶活性回收率82．6％。实验证明：响应面法优化双水相萃取木瓜蛋白酶的条件是可行的，可用于实际预测。关键词：木瓜蛋白酶，双水相，分配系数，酶活性回收率Extractionofpapaininaqueoustwo-phasepol

3、yethyleneglycol／sodiumsulfatesystemsWANGWei-tao，ZHANGHai-de，JIANGZhi-guo，DONGAn-hua，XUYing-hao，PENGJian，WANGFei(CollegeofFoodScienceandTechnology，Haikou570228，China)Abstract：ThepapainwasseparatedandextractedbyPEG／Na2s04aqueoustwo-phasesysteminthisstudy．Theinfluence0frea

4、gentandpHvalueonactivity0fpapainwereinvestigated，inthemeantime。theinfluenceofPEGwithdifferentmolecularweights，themassfractionofNa2SO4andPEG，pHandenzymeaddedondistributionbehaviorinaqueoustwo—phasesystemwasdiscussed．Theseparationconditionofpapainjnaqueoustwo—phasesystemw

5、asoptimizatedbyresponsesurfacemethod，andamplifiedinlaboratoryscale．Thestudyshowedthat：theeffect0fNaSO4massfractiononthedistributionbehaviorwassignificant，followedbvPEGmassfraction．theeffectofpHonthedistributionbehaviorwasnotsignificantThepartitioncoefficientandrecoveryr

6、ateofpapaininaqueoustwo—phasesystemachieved3．1and82．6％undertheconditionOfmolecularweightsofPEG6000，massfractionofPEG16．0％，massfractionofNa2SO418．O％，pH7．0，enzymeadded1．Omg／g．Theresultsshowedthat：theoptimizationonextractionofpapainbyaqueoustwo—phasesystemwasfeasibleandcou

7、ldbeusedtopredicttheactua1．Keywords：papain；aqueoustwo—phasesystem；partitionCOefficient；recoveryofproteaseactivity中图分类号：TS255．1文献标识码：A文章编号：1002—0306(2014)18一ol18—06doi：10．13386／j．issnl002—0306．2014．18．016木瓜蛋白酶(EC3．4．22．2)具有耐高温、稳定性好、简单、易于工程放大和连续操作等优点，非常适合大蛋白质水解能力强等特征，在食品、

8、医药等领域有广规模应用嘲。而对木瓜蛋白酶双水相萃取的研究主要泛的应用。目前木瓜蛋白酶的分离纯化方法主要有：集中PEG／(NH4)2SO和PEG／~酸盐双水相系统⋯，超滤法、盐析法、有机溶剂法、亲和层析法等。但这些PEG／