骨髓增生异常综合征骨髓活检切片免疫组织形态学的研究进展.pdf

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1、·52·医师进修杂志1999年12月第22卷第12期·进修讲坛·骨髓增生异常综合征骨髓活检切片免疫组织形态学的研究进展浦权,杨梅如(上海市第六人民医院,上海200233)中图分类号:R551.3文献标识码:A文章编号:1002-0764(1999)12-0052-03骨髓活检切片内免疫组织化学及免疫组织形态空—冷包埋、简易冷丙酮固定之GMA包埋、微波热学的检测是近年来骨髓增生异常综合征(MDS)诊处理技术以及甲基丙烯酸酯(MMA)包埋技术的推[5,6]断工作中的一项重要操作技术。使用一组系列特异广,外加切片免疫酶标染色再结合其它组织学性或选择性单抗去区分出MDS

2、的一些免疫表现技术的联合,就能更进一步提高MDS潜在阳性标[1,2][2]型,就可作为对FAB标准分型的补充,并可从记物的识别。目前最常用的联合技术包括:更深层次去寻找早期造血前体细胞病态造血的特(1)切片免疫酶标染色与氯醋酸酯酶(Leder染点。色)或萘酚—醋酸酯酶等组化技术的联合。前者指目前,骨髓切片内常用的髓性和淋巴性免疫组供髓系前体细胞的选择性染色,后者指供单核系和化标记分析法,对MDS的诊断与鉴别十分重要。巨核系前体细胞的染色。例如,使用一组单抗已能检出MDS的一些免疫表(2)使用两种不同偶氮染料,经由APAAP免疫[1,3]现型。其中,以髓源性(CD

3、13、CD14、CD15、酶标方法,测试两种不同单抗的连续双标记免疫标CD33和CD34)标记物最为常用,而真正的原淋巴记检测。+++细胞性(TdT、CD19、CD10)以及双表型模式也(3)切片免疫酶标染色与免疫形态学测量的联已有记载。某些MDS,尤其是RAEB等高危患者,合。病程中可显示干细胞—髓系细胞分化的早期膜表面(4)免疫染色与原位荧光杂交(FISH)的联合,标记—CD34阳性反应,带有此种CD34表面标记的此种检测能够察觉先前免疫标记间期细胞中的细胞[4]高危MDS患者易向AML转化。切片免疫酶标遗传学异常。技术也有助于病态多形性巨核细胞,尤其是微巨

4、核1系列特异性单抗的应用的识别。此外,MDS患者切片内小梁旁区处于同一MDS骨髓活检切片内主质细胞特异标记的显发育阶段的幼红细胞簇与淋巴细胞簇的鉴别在常染示常能为病态造血细胞的起源或其类型作出精确判色下往往有一定困难,这时,使用抗人血红蛋白或抗断。常用的髓性分化抗原包括:CD34、CD13、CD[5]血型糖蛋白(AGP)A抗体,就可准确地鉴别开来。33、CD15、CD14、CD41、CD61、CD68、因子Ⅷ相关由此可见,切片内的免疫标记染色将显著提高MDS抗原和血型糖蛋白A、C等。诊断的精确性。可以这样说,MDS的骨髓检验必须1.1抗CD34单抗与真性“ALI

5、P”的识别由于活从既往的单纯依赖穿刺物涂片之髓象分析和细胞水检切片内的“幼稚前体细胞异常定位”(ALIP)可由平上的免疫细胞化学的分析研究,进入髓象与切片髓系前体细胞(真性)或巨核系和红系前体细胞(假组织病理学和组织水平上特异标记的免疫组织形态性)两类细胞组份所构成,故人们相继提出使用一组学改变相结合的新水平。系列特异性单抗,经由免疫酶标染色去识别这些细[2]就现阶段而言,优良的骨髓切片免疫组化检测,胞集簇。CD34(人祖细胞抗原—HPCA-1)是在必须在特殊处理过的塑料包埋标本上进行。而此项正常全潜能干细胞、定向祖细胞和淋巴性前体细胞技术在国内、外许多实验室中

6、尚无法普及。随着真上表达的一种跨膜糖蛋白。QBEND10是一种抗—医师进修杂志1999年12月第22卷第12期·53·[2,10]CD34单抗,正常骨髓切片中以此单抗经免疫酶标核细胞群约占总巨核细胞数的10%～20%。染色测得CD34阳性细胞不超过骨髓细胞数的并发现所有CD61阳性单个核细胞,一旦其直径<1%。而MDS时阳性细胞的比率与分布均与正常15μm时,均应划入微巨核一档。文献中所谓的微人有显著的差异。随着疾病自低危至高危的进展,巨核完全是根据胞体直径的大小为依据,而不是按切片内不仅CD34阳性细胞的比率进行性增高,且细胞的发育成熟程度,即这一部分的微巨核

7、细胞内,显示有形成集簇的倾向。切片内髓系前体细胞和红亦包括前原巨核和原巨核两者在内。通过MDS患系/巨核系前体细胞所构成的集簇,在形态学上较难者骨髓涂片和活检切片内CD61免疫标记染色之作出准确鉴别。这时,CD34免疫染色即可识别出检测,已证明涂片的前原巨核细胞之直径为(10.3±2带有强烈髓系前体细胞标记的真性ALIP。此外,集0.6)μm,面积(大小)为(69.6±1.3)μm,而活检簇的大小也有助于真性和假性ALIP的鉴别,检出切片内CD61阳性前原巨核细胞胞体直径为7.8～[7,8]2>6个细胞之巨大集簇,常属真性ALIP,患者预10.1μm,胞体面积<

8、50μm,证明切片较涂片