胶体金免疫层析检测牛结核γ干扰素方法的建立.pdf

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1、中国动物传染病学报2010，18(1)：45—50ChineseJouma1ofAnimalInfectiousDiseases研究论文胶体金免疫层析检测牛结核Y干扰素方法的建立钱琨，尹天燕，赵士学，黄大卢，金文杰，秦爱建(扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室，扬州225009)摘要：牛结核病是一种重要的人畜共患病，尽管许多国家已经实施了牛群净化，但其仍然威胁人类的公共卫生健康。本研究利用抗牛Y干扰素特异性单克隆抗体，通过免疫金标记技术，建立了胶体金免疫层析试纸条检测牛y干扰素的方法。研究结果证明，该方法对

2、牛y干扰素具有高度特异性，与其它动物干扰素没有交叉反应，检测牛Y干扰素的灵敏度与进口ELISA试剂盒相当。试纸条在室温保存6个月、4℃保存12个月，其特异性及灵敏度没有明显变化。对田间送检的23份全血经结核特异性刺激后进行检测，结果与进口结核ELISA试剂盒符合率为91．3％。研究表明，本研究建立的牛y干扰素免疫层析检测方法具有特异、敏感、稳定、操作简单快捷等特点，适合用于牛结核的快速特异检测。关键词：牛结核病‘5牛Y干扰素‘5单克隆抗体；胶体金免疫层析中图分类号：$858．235．2：R392文献标识码：

3、A文章编号：1674—6422(20l0)0l一0045—06DEVELoPMENToFANIMMUNoCHRoMAToGRAPHICSTIUPFoRRAPIDDETECTIoNoFBoVINETUBERCULOSISINF．YQIANKun，YINTian—yan，ZHAOShi—xue，HUANGDa—lu，JINWen-jie，QINAi-jian(KeyLabofJiangsuPreventiveVeterinaryMedicine．YangzhouUniversity,Yangzhou225009

4、．China)Abstract：Bovinetuberculosis(TB)isstillazoonoticproblemontheworld．Despitethefactthateradicationprogramsarebeingimplementedinmanycountries，itisstillapublichealthproblem．AnimmunochromatographicstripassayfordetectionofbovineINF-Ywasdevelopedinthisstudy．

5、ComparedwiththeELISAkit，thestripwasspecificfordetectingbovineINF—v．Thestripsretainedtheirsensitivityandspecificityforsixmonthsatroomtemperatureor12monthsat4℃TwentythreesamplesfromCOWSpotentiallyinfectedwithTBweredetectedusingthestripandELISAkit．Theagreemen

6、tofthesetwomethodswas91．3％．TheimmunochromatographicstripfordetectionofbovineINF—vhashighspecific／ty,sensitivityandstability．Togetherwiththeadvantagesofrapiddetectionandeasyoperationwithoutrequirementforspecialskillsandexpensiveequipment，thismethodissuitabl

7、efortheon-sitedetectionofbovineTBassayKeyWords：Bovinetuberculosis；bovine1NF—Y；monoclonalantibody；gold-immunochromatographicstrip收稿Et期2009—11一l6基金项目江苏省高校自然科学重大基础研究项目(合07KJA23021)；省研究生科研创新计划(CX09B一317Z)作者简介钱琨和尹灭燕同为第一作者。钱琨，男，博士，讲师，主要从事分子病毒学及免疫学研究；尹天燕，女，硕士研究生，

8、手要从事病原诊断学研究通讯作者秦爱建，E—mail：aijian@yzu．edu．cn·。_——46。_——中国动物传染病学报2010年1月牛结核病是由牛分枝杆菌和结核分枝杆菌所引IgG、HRP标记兔抗鼠IgG(全分子)、聚乙二醇起的一种慢性消耗性传染病，可通过病畜传播给人4000(PEG)、弗氏完全佐剂(Freund’SAdjuvant类或其它动物。结核病除了感染人外，还能感染50complete)、弗氏不完全