抗人球蛋白试验阳性及其临床意义的探讨.pdf

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1、ISSN1007—8738细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMollmmuno1)2011，27(111245·论著·文章编号：1007—8738(2011)11—1245一O2抗人球蛋白试验阳性及其临床意义的探讨张勇萍，杨世明，曹丽妍，苏小花，安宁(第四军医大学唐都医院输血科，陕西西安710038；。陕西省人民医院中心实验室，陕西西安710068)[摘要]目的：观察抗人球蛋白试验(AGT)的临床应用及对凝胶卡、专用离心机、孵育器及其配套设备由瑞士达亚美公自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的诊断价值。方法：采用微柱司提供。凝胶法和传统试管法，对368例临床表现

2、疑似为AIHA、风湿1．2检测对象临床表现疑似为AIHA、风湿免疫性疾病及免疫性疾病及新生儿溶血病患者的血标本进行AGT。结果：新生儿溶血病患者的血标本368例，病种有血液系统疾病、在368例患者血标本中AGT阳性209例(56．8％)，其中直接肝脏疾病、风湿免疫类疾病及感染性疾病等。患者均有不同抗人球蛋白试验(DAT)阳性187例(89．5％)，间接抗人球蛋白试程度的黄疸、肝脾肿大等贫血症状。验(IAT)阳性12例(6．4％，DAT和IAT均阳性10例(5．3％)。1．3方法AGT阳性的类型分布为IgG+c3型118例(63．1％)，IgG型1．3．1DAT试验

3、采集患者EDTAK2抗凝血5mL及不抗凝45例(24．1％)，c3型24例(12．8％)。12例IAT阳性经抗体血5mL，离心分离血浆与血清，将红细胞用生理盐水洗涤3特异性鉴定为抗D2例(16．7％)，抗E5例(41．7％)，抗C1次，配成5％的红细胞悬液。试管法：取试管4支，分别标记例(8．3％)，抗Ec2例(16．7％)，抗e3例(25．0％)。10例被检、阴性、阳性及自身对照，在各管中加入相应的反应物，DAT和IAT均阳性者为新生儿溶血病引起的免疫性抗体。混匀后置37℃孵育5min，取出后以3000r／min离心15S，结论：AGT能较敏感地检出吸附在红细胞

4、膜上的IgG和补体然后用肉眼或显微镜观察结果。微柱凝胶法：将0．8％的红c3等免疫性抗体，对AIHA的诊断有重要临床意义。但AGT细胞悬液50加入LISSCoombs凝胶卡中，1030r／min，离存在一定的假阳性和假阴性，应同时做阴阳性对照才能确保,E,IOmin，观察结果。与多特异性抗人球蛋白试剂呈阳性反试验结果的准确性。应的血标本，再分别用抗IgG和抗c3试剂进行分型试验。[关键词]自身免疫性溶血性贫血；抗人球蛋白试验；抗体1．3．2IAT检测对DAT阴性或阳性患者的血标本再进行鉴定IAT检测，将2滴被检者血清加入试管中，加1滴5％的试剂[中图分类号]R45

5、7．1[文献标识码]B红细胞悬液，混匀置37℃孵育30min，试管法用生理盐水洗涤3次，加入2滴抗人球蛋白血清，混匀后置37~C5min，取抗人球蛋白试验(antiglobulintest，AGT)也称出1000r／min离心1min，然后用肉眼或显微镜观察结果。Coombs试验，是临床上进行血型血清学检测的经典微柱凝胶法：将被检血清50加入微柱凝胶卡中，再加0．8％方法。AGT分为直接抗人球蛋白试验(directanti—的试剂红细胞悬液50，在37'E孵育15min，专用离心机1030globulintest，DAT)和间接抗人球蛋白试验(indirectr／

6、rain离心10min，观察结果。被检者阳性的血标本再用谱细antiglobulintest，IAT)。我们采用微柱凝胶法和传统胞进行抗体特异性鉴定及其效价测定。1．3．3DAT与IAT的结果判断阴性对照管不凝集，阳性对试管法AGT，对368例临床表现疑似为自身免疫性照管凝集，则被检管出现凝集者为阳性；被检管不凝集者为溶血性贫血(autoimmunehemolyticanaemia，AIHA)、阴性。微柱凝胶法加入反应物经离心后，红细胞聚集在凝胶风湿免疫性疾病及新生儿溶血病等患者的血标本进卡的上端者为阳性，在凝胶卡的下端者为阴性。行对比检测，并对检测结果及其影响因

7、素进行了分析。2结果2．1AGT的阳性率在368例患者血标本中AGT阳性2091材料和方法例(56．8％)，其中DAT阳性187例(89．5％)，IAT阳性12例1．1试剂与仪器多特异性抗人球蛋白试剂(含抗IgG和(5．7％)，DAT和IAT均阳性10例(4．8％)。DAT阳性的类C3)、单特异性抗人球蛋白试剂(分别含抗IgG，抗c3)、抗型分布为IgG+c3型118例(63．1％)，IgG型45例D、抗E、抗C、ABO血型反定型细胞、抗体筛查细胞及抗体(24．1％)，C3型24例(12．8％)。鉴定谱细胞均由上海血液生物医药有限责任公司提供。微柱2．2IAT阳性

8、的特异性1