浅析母鸡生产的IgY类抗体优势.pdf

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1、秣河南需牲善座2015年(第36卷)第1期浅析母鸡生产的IgY类抗体优势郑晓凡(新乡市动物卫生监督所,河南新乡453700)摘要:IgY普遍存在于鸟类、爬行动物和两栖类,在功能上等价于哺乳动物IgG,但其许多生物学性质仍未被发现。近来许多研究者分析了IgY的基因组成和生物学功能,而且证实其为哺乳动物IgG和I的直接起源。鸡能将血清中的IgG通过胎盘传输至鸡蛋黄中,鸡蛋黄中的抗体被称为IgY。随着畜牧业的发展,鸡蛋产量的增高,加上鸡蛋黄中IgY的含量高、提取简便,IgY作为被动免疫的载体已被广泛地应用于医学及诊断学的各个领域。关键词:IgY类抗体;免疫中图分类号:$852.4文献标识码:B文章编

2、号:1004—5090(2015)01—0009—02传统的多克隆抗体制备多采用兔子、山羊、马等哺乳的IgG产生量,或是15只兔子一个月的产生量。动物,由于受到抗体纯化、血清收集等方面的影响,逐步向2.3特异性高单克隆抗体与重组抗体方向发展。笔者针对母鸡作为一传统的抗体Fc段能特异性结合类风湿性因子,在免种特殊的抗体生产工具,做简单探讨。疫检测中,增加了假阳性的反应,而IgY不与风湿性因子1母鸡作为试验动物的优势结合,作为检测试剂,具有独特的优势。1.1饲养简单2.4不激活补体母鸡作为试验动物,普通圈舍饲养。传统的蛋鸡饲哺乳动物的血清中含有补体,进行相关试验时要进行料、饮水习惯、管理方法即可,

3、有利于规模化生产。灭活,而IgY不含补体系统,可避免补体系统的干扰,减少1.2试验简单假阴性的发生。如用人、鼠或兔的IgG包被微孔板,人血试验动物仅需15d为一免疫周期,肌肉注射相关种类清中的补体被激活后,可抑制抗原与抗体的结合。抗原,45d就可以进行鸡蛋收集,此后不再免疫,在8ld前2.5稳定性好收集的鸡蛋均为阳性。2.5.1热稳定性好1.3与人种属较远,免疫反应较强只要温度低于75℃就不会发生热变性,经65℃处理鸡与以人类为代表的哺乳类动物种属关系较远,微量1h其效价维持不变,这提示采用一定的消毒方法如巴氏抗原就能产生较强的免疫应答反应。消毒对其进行处理,既可消灭一定的病原体又可维持抗体1

4、.4鸡蛋收集方便活性,为IgY的提取和精深加工生产提供了指导。传统的抗体制备需要对试验动物屠杀或采血等,而采2.5.2酸碱稳定性好用该方法,仅需要收集鸡蛋即可。pH为3-11的环境中,37℃1h后IgY仍保持较高的活2鸡蛋作为抗体直接来源的优势性;pH为2时,IgY的活性下降50%。2.1纯度高2.5.3反复冻融性好用抗原免疫母鸡后,经过免疫系统的加工处理,蛋黄兔源的抗体,不能反复冻融,为生产应用带来很多不中只有IgY一种抗体,其含量和纯度超过鸡血清IgG,其可便,而IgY具有很优良的耐反复冻融性,即使经5次反复冻产生6倍于鸡血浆抗体浓度的抗体,抗体成分单一,便于融,其抗原结合活性也几乎未受损

5、失。蛋白纯化与应用。2.5_4胃蛋白酶耐受性好2.2产量高在pH为4.0的条件下,将lmlIgYJJ12k0.1ml20~xg/ml1个鸡蛋可以产生100mg左右的IgY,传统的兔子免混匀,置于37℃水浴处理4h后,其活性下降16%,至8h疫中,免疫一只兔子每月仅可获得200mg的IgG。母鸡每后仍维持同样活性水平。个月生产的鸡蛋所产生IgY的量相当于200只小鼠一个月2.6制备基因专一性IgY抗体~l_·1.2015年(第36卷)第1期利用基因组学和免疫原性分析学等生物信息学,选择卵黄抗体,才能真正的发挥母鸡作为抗体在生产上的优势。编码蛋白质功能区的基因片段作为免疫原,这样在很大程参考文献:

6、度上省去了抗原体外表达、纯化等中间步骤,加快抗体的[1]唐金宝,吉爱国.基因专一性鸡卵黄抗体(IgY)的研究制备过程,也避免抗原制备过程中杂蛋白质的污染,使及应用,生命的化学,2004,24(1).IgY抗体对目标蛋白更具有特异性。。[2]ItoK,ShinoharaN,KatoS.DNAimmunizationviaI生产工艺简便、见效陕3IgY作为一种理想的绿色饲intramuscularandintradermalroutesusingagenegun料添加剂、检测试剂、治疗性试剂已被广大研发、生产工作者providesdifferentmagnitudesanddurationsoni

7、mmune接受,并得到了广泛的应用,取得了较好的效果。然而,现在response.MolImmuno1.2003,39(14):847—854.IgY产缺乏相应的操作规程和有效的监督,出现了干扰母[3]任平国,徐启红.鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)分离纯化的鸡常规免疫程序、产品不稳定、纯化粗糙等问题。因此,只有研究.现代食品科技,2007,(23):11.加强对鸡场的生产管理,采用合理的免疫程序,正确

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