热毒宁注射液治疗大鼠急性放射性肺损伤的实验研究.pdf

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1、临床医药文献杂志2015年2月B第2卷第5期828JournalofClinicalMedicalLiteratureFeb．B2015、1．2NO．5热毒宁注射液治疗大鼠急性放射性肺损伤的实验研究隋晓梅，朱勤伟，杨兆禄，孙秀梅，张启富，魏永强(1．潍坊医学院附属医院放疗科，山东潍坊261031；2．潍坊市中医院急诊科，山东潍坊261041)【摘要】目的为临床应用热毒宁注射液治疗放射性肺炎提供实验依据。方法45只雄·I~Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、热毒宁组。用6MV-X线直线加速器对大鼠双肺

2、进行单次照射15Gy，照射后第l天开始给药，连续用药28天。取大鼠右上肺组织行HE染色观察病理改变；western．blot法检测各组大鼠第4周TNFct和IL．6的表达。结果HE染色结果显示：模型组大鼠肺组织第1周便出现放射性肺炎改变，第4周放射性肺炎最显著；热毒宁组大鼠肺组织放射性肺炎反应较模型组明显减轻。western-blot结果显示：空白组、热毒宁组大鼠肺组织比模型~TNFa和IL一6显著降低，差异有统计学意义(P<0．05)。结论热毒宁注射液可通过抑制致炎细胞因子TNFa和IL-6的表达，起

3、到治疗放射性肺炎的作用。【关键词】放射性肺炎；热毒宁；炎症反应；细胞因子【中图分类号】17,285．5【文献标识码】B【文章编号】ISSN．2095—8242．2015．05．828．02放疗导致的放射性肺损伤是胸部肿瘤放疗最常见的并存，以备western．blot法检测肺组织TNFa和IL．6的表达。发症之一，目前临床采用的防治放射性肺损伤的药物以糖1．7指标检测皮质激素为主，其疗程长，副作用大。热毒宁注射液是一1．71HE染色观察病理改变种纯中药制剂，具有清热、解毒、抗感染等作用，且安全取甲醛固定肺

4、组织，石蜡包埋，5um连续切片，HE染无毒副作用，在临床上被广泛应用于上呼吸道感染及急性色，光镜观察肺组织炎性病理变化。支气管炎。本研究观察热毒宁注射液对大鼠急性放射性肺l_7．2western-blot观察TNFa和IL．6蛋白表达损伤的疗效并探讨其机制。取液氮保存肺组织，提取总蛋白，SDS．PAGE电泳分离蛋白，选取目的条带进行湿转膜，转膜后加一抗4℃过1材料与方法夜，TBST洗膜3次后，辣根过氧化物酶HRP标记的二抗孵育1．1实验动物1h，暗室内显色曝光，图像分析。健康SPF级Wistar大鼠45

5、只，雄性，体重(200±20)g，1．8统计学方法由山东鲁抗医药公司提供(许可证号：SOXK~20080002)。所有数据应用SPSS18．0软件进行统计学处理，计量资1．2药品与试剂料以“±”表示，采用单因素分析，以P<0．05为差异有热毒宁注射液(江苏康缘药业股份有限公司，国药统计学意义。准字Z20050217)10ml／支；试剂：大鼠肿瘤坏死因子．0【(TNF—G【)和大鼠白细胞介素．6(IL一6)、westernblot及2结果ELISA试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。2．1各组大鼠肺

6、组织HE染色病理学改变1．3仪器光镜下：空白组大鼠肺泡间隔完整，无断裂及增厚美国瓦里安21EX直线加速器、TDGC(zD)，高速低温现象，肺组织结构清晰，肺泡壁薄而均匀，肺泡腔大。模离心机购自德国Hemeus公司，微量电子天平购自德国Stratos型组大鼠肺组织于第1周便出现明显炎症反应，第4周炎症公司，凝胶图像分析系统购自美[~Alphainnotech公司。反应最为显著，表现为肺内充血、支气管周围毛细血管充1．4动物分组及造模血、肺泡间质水肿、肺泡内充满大量渗出液、大量的成簇45只Wistar雄性大

7、鼠适应性饲养一周后，随机分为空的慢性炎细胞浸润，肺泡腔变小。热毒宁组第4周大鼠肺组白组、模型组、热毒宁组各15只。除空白组外其余两组大织放射性肺炎反应较模型组明显减轻。鼠均进行急性放射性肺炎造模：2％戊巴比妥钠1．2ml／kg2．2western-blot检测结果腹腔注射麻醉后固定大鼠，用6MV-X线直线加速器对大鼠空白组大鼠肺组织比模型组TNFct和IL一6显著降低，差进行单次全胸照射15Gy，源皮距98．5cm(大鼠胸部体厚异有统计学意义(尸

8、穿照射，用多叶光栅屏蔽大鼠头部及体较，TNFct和IL．6蛋白的表达显著降低，差异有统计学意义部，照射剂量率为300cGy／min。(P<0．05)。1．5给药方法及剂量3讨论于照射后第1天开始给药，热毒宁组给予热毒宁在胸部肿瘤放疗过程中，肺组织会受到一定剂量的照2．5ml／kg·d，模型组和空白组给予相当量的生理盐水，灌胃射，造成不同程度的放射性肺损伤。分子生物学的研究进给药，1次／d，连续给药28天。展进一步阐述了放射性肺损伤的发生机制