白藜芦醇治疗大鼠急性胰腺炎肺损伤的实验研究

白藜芦醇治疗大鼠急性胰腺炎肺损伤的实验研究

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1、白藜芦醇治疗大鼠急性胰腺炎肺损伤的实验研究作者:任雷,马清涌,王铮,李震东【关键词】白藜芦醇;胰腺炎;肺损伤;选择素;大鼠  摘要:目的探讨急性胰腺炎(AP)大鼠肺损伤与肺组织选择素(选择素P、选择素E)表达的关系及白藜芦醇对肺损伤的作用。方法96只雄性大鼠分为对照组、模型组、治疗组、溶剂组。用40g/L牛黄胆酸钠逆行胆胰管注射建立胰腺炎模型,治疗组在建模后立刻经阴茎静脉注射溶解于吐温80溶剂中的白藜芦醇(10mg/kg)。术后3、6、12h取材,盲法光镜下观察大鼠肺组织病理学改变,同时检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中的白细胞数及肺组织髓过氧化物酶(MPO)

2、活性,免疫组化法检测肺脏毛细血管内皮选择素P、选择素E表达。结果治疗组肺组织损害明显较模型组肺组织轻(P<0.05);随时间推移模型组BALF中白细胞数及肺组织MPO活力逐渐增高,而治疗组BALF中白细胞数及肺组织MPO活力在各时间段均较模型组降低(P<0.05);选择素P、E在模型组呈强阳性表达,治疗组表达较弱。结论在胰腺炎肺损伤中白藜芦醇可能通过降低肺脏毛细血管内皮选择素表达,使白细胞与内皮细胞黏附减少,炎性细胞局部浸润降低,而达到治疗胰腺炎肺损伤的目的。  关键词:白藜芦醇;胰腺炎;肺损伤;选择素;大鼠  Theexperimentalstu

3、dyofresveratrolintheacute pancreatitisbinedentalpancreatitistoselectinPandselectinEandtostudytheeffectsofresveratrolonALI.MethodsAtotalof96maleSDratslyodel),resveratroltreatedgroupandtodelofacutepancreatitisedbyinjecting4%sodiumtaurocholateintothebiliopancreaticduct.Resveratrolodeli

4、ng.Todeling.ThedegreeofALIonarymorphologicchanges,leucocytesofbronchialveolarlungfluid(BALF)andmyeloperoxidase(MPO)inlungtissue.TheselectinPandselectinEinvascularendotheliumoflungtissuemunohistologically.ResultsSeverepulmonarymorphologicchangesountofMPOepassing.ThereountofMPO(P<0

5、.05).SelectinPandselectinEareexpressedmorepositiveinpancreatitisgroupthanintreatmentgroup(P<0.05).ConclusionTheeffectofreducedseverityofALIduringacutepancreatitisbyresveratrolmightberelatedtotheinhibitionoftheselectinexpressionandreductionoftheadhensionbetmatorycellsandendotheliu

6、mcells.  KEYPO)检测。  1.5形态学检查及肺组织评分常规石蜡切片,HE染色,确定胰腺炎诊断,按肺水肿、出血、炎性细胞浸润、小气道损伤进行评分,每项5个等级:0、1、2、3、4。  1.6支气管肺泡灌洗的收集及白细胞计数开胸后观察肺脏,切取右侧肺脏,由主支气管插入直径2mm无菌塑料导管并固定,恒压注入无菌生理盐水3mL,共3次,收集灌洗液,用于白细胞计数。  1.7肺组织MPO活性检测取肺组织约100mg,加5g/LHTAB2mL制备匀浆,反复冻融3次并超声粉碎(10s,3次),4℃3000r/min离心30min,取上清0.1mL加反应液2.9

7、mL,保持温度于25℃,立即在分光光度计460nm波长下进行2min的扫描,记录第30s和第90s的吸光度差值,以此1min内吸光度的变化代表酶活力的改变,MPO活力单位(U/g)=(ΔA460/min)/11.3×(g所加组织量/L反应液)。  1.8肺脏组织选择素P、E的测定取大鼠左上肺组织,大小约2.5cm×1.5cm×0.5cm,Bouin液固定,石蜡切片,严格按照试剂盒说明步骤进行操作,免疫组化结果用图像分析系统进行处理。  1.9统计学处理数据以均数±标准差(±s)表示,采用单因素方差分析,SPSS统计软件进行分析,P<0.05表示有显著性差

8、异。  2结果  2.1肺组织形态学变

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