微柱凝胶间接抗球蛋白法在筛查患者红细胞不规则抗体中的临床应用.pdf

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1、中外医学研究2009年12月第7卷第13期CHINESEANDFOREIGNMEDICALRESEARCH》

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11、lI微柱凝胶间接抗球蛋白法在筛查患者红细胞不规则抗体中的临床应用王维牛新海镇江市丹徒区人民医院检验科(江苏镇江212003)【摘要】目的探讨微柱凝胶间接抗球蛋白法在筛查患者红细胞不规则抗体中的临床应用价值，进一步增强临床用血安全。方法采用微柱凝胶间接抗球蛋白法对手术备血或有输血预期的住院患者进行红细胞不规则抗体筛查，阳性标本再用凝聚胺法和试管间接抗球蛋白法做比较。结果阳性结果9例，阳性率为0．4％，其中自身冷抗体l例、抗M1例、抗Le1例、

12、抗E4例、抗C1例和抗e1例。凝聚胺法漏检2例，试管间接抗球蛋白法漏检1例。结论微柱凝胶间接抗球蛋白法具有标本用量少、操作简便、灵敏度高、重复性好、结果清晰稳定以及筛查时间短，可以替代凝聚胺法和试管间接抗抗球蛋白法，积极推广其在临床上使用。【关键词】不规则抗体；微柱凝胶技术；凝聚胺法；间接抗球蛋白法红细胞不规则抗体是指ABO血型系统抗A、抗B以外的血只试管中，不含抗凝剂试管加入5mL，含EDTA—K2抗凝剂试管型抗体，主要是经输血(常见于反复输血)或妊娠等免疫刺激而加入1mL。不抗凝标本均经恒温水温箱37℃孵育1h后3500产生，多为免疫性不完全抗体且多为IgG类抗体，可以引起迟发

13、r／min离心10min，确保血清中无纤维蛋白凝块。抗凝标本用生型免疫性溶血性输血反应和新生儿溶血病，严重时可危及患者的理盐水充分洗涤、离心3次，并用Diamed2号稀释液配制成1％生命。患者入院后进行红细胞不规则抗体筛查具有重要的临自身对照细胞。床意义，可以发现有意义的不规则抗体，为患者选择合适血液输1．3．2不规则抗体筛选使用前先将微柱凝胶卡在专用卡式离注而提供重要依据，使交叉配血更具有针对性，另外还可以避免心机内1000r／rain离心1min，以防运输过程因倒置颠簸造成凝在短时间内找不到相配合的血液而延误抢救良机。红细胞规则胶界面不整齐而影响实验结果。按试剂盒操作说明书进行

14、实验抗体筛查的传统方法有凝聚胺法和试管间接抗球蛋白法，但存在操作：首先在凝胶卡上标记，每个被检标本占用2个微柱，用微量一些缺点，如凝聚胺试验易受抗凝剂、药物、血清蛋白、温度等因定量加液器沿着微柱内壁向柱内分别加入1％的筛选细胞和自素的影响，而试管间接抗球蛋白法对条件要求很高、操作要求严身对照细胞各5L，再各加入25L被检血清；在37℃专用孵育格及操作步骤繁琐。微柱凝胶间接抗球蛋白法是近年来开展的器内孵育15min；移入专用卡式离心机内1000r／min离心l0筛查不规则抗体的一项新技术，操作简便、灵敏度高、重复性好且rain。结果判定：红细胞全部沉积存微柱底部者为阴性，滞留在凝大大

15、缩短了筛查时间。笔者采用微柱凝胶间接抗球蛋自法，对笔胶表面上或中间者为阳性。者所在医院手术备血或有输血预期的2256例患者血样进行红1．3．3不规则抗体鉴定操作步骤及结果判定基本等同于“不细胞不规则抗体筛查，同时对不规则抗体阳性血样与凝聚胺法和规则抗体筛选”步骤，但每个阳性标本占用10个微柱，且无需自试管间接抗球蛋白法作比较，探讨微柱凝胶间接抗球蛋白法在筛身对照细胞。最后，根据1—10号细胞的反应结果与谱细胞反应查红细胞不规则抗体中的临床应用价值，现将结果报道如下。格局表进行比对，得出不规则抗体的名称。1资料与方法1．3．4阳性标本对比试验①凝聚胺法标记试管，依次加患者1．1一般资

16、料2256份不抗凝静脉血佯全部来自于2005年1血清2滴、5％抗体筛选细胞1滴、低离子介质0．7m1，混合均匀，月～2009年6月之间有手术备血或输血预期的住院患者，其中再加凝聚胺2滴，并混合均匀。3400r／rain离心10S，倒掉上清男性1072例，女1l84例；年龄为3～82岁。液，但不沥干，让管底残留液体约0．1mL。轻轻振摇试管，目测1．2试剂与仪器红细胞有无凝集，若无凝集则重复上述步骤，有凝集则加入悬浮1．2．1试剂微柱凝胶(内含凝胶及广谱抗人球蛋白)、Di一液2滴，轻轻振摇试管并观察结果。结果判定：30S内凝集散开，amed2号稀释液、由瑞tDiamed公司提供；抗体

17、鉴定用谱细胞表明是由凝聚胺引起的非特异性凝集，结果为阴性；30s内凝集(由1号10号细胞组成)、广谱抗人球蛋白试剂由上海输血技不散开，则为红细胞抗原抗体的特异性反应，结果为阳性。②试术有限公司提供；凝聚胺来自(台湾)珠海贝索生物技术有限公管间接抗球蛋白法标记试管，加入受血者血清2滴和5％筛选细司；1％和5％抗体筛选细胞由5份O型健康献血者红细胞(镇江胞l滴，混匀后静置于恒温水温箱37℃孵育1h。目测有无溶血市中心血站提供)等份混合l并充分洗涤3次后用Diamed2号稀