新城疫、禽流感H5亚型（Re-5株）抗体水平监测.pdf

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1、编辑：姚俊杰E—mail：vaojuniie070l@126．com新城疫禽流感H5亚型(Re一5株)抗体水平监测张桂贤(临沂大学生命科学学院动物疫病抗体检测中心，山东临沂276005)新城疫以高热、呼吸困难、下痢、神经紊乱、黏技术开发公司批号分别为201102、201003。膜和浆膜出血为特征。目前出现的鸡新城疫发病率2方法一般在10％～25％，死亡率在15％～35％，产蛋鸡产2．1血样的处理蛋率下降30％左右，是危害养禽业的一种主要传染血液样品50份，将其编号．待样品凝固后自然病。禽流感(AI)则是由A型流感病毒引起的一种禽析出血清可直接吸取血清待检或将血液样品类急性、热性、

2、败血性、高度接触性传染病，不仅给2000～3000转／分钟，离心15分钟，用移液枪吸取血畜牧业造成了巨大的损失，而且给人民身体健康带清加入灭菌的0．5毫升离心管。若需较长时间保存来严重威胁。我国政府将其列为一类动物疫病，家血清，可置于4℃或一20％冰箱。禽一旦感染高致病性禽流感病毒，死亡率为100％。2．2鸡红细胞悬液2010年以来总体来说我国家禽的禽流感防控用2毫升注射器采集未免疫的健康公鸡(翅静形势平稳，未见H5N)亚型高致病性禽流感疫情报脉采血)的血液放于含有抗凝剂的灭菌离心管内告。但局部地区仍有疑似低致病性禽流感(主要是(按每毫升血加入3．8％灭菌柠檬酸钠0．2毫升做抗H

3、9亚型)和非典型禽流感出现。沂南县某规模化蛋凝剂)，迅速混匀。如当时不用，可采血放人阿氏液鸡场采血样50份向笔者所在院动物疫病抗体检测内(保存液2份，血液1份)于4~C冰箱内可保存两中心送检，以监测鸡场新城疫和禽流感H5亚型周。再用PH值7．2的0．01摩尔／升PBS液洗涤3(Re一5株)抗体水平，为鸡场后续免疫计划的制定次，每次均以1000转／分钟离心l0分钟。洗涤后用奠定基础。PBS配成0．5％～1％(V／V)红细胞悬液，4~C保存备1材料用。对免疫状态不明的鸡，应至少洗涤5次，每次离1．1仪器心后都要将红细胞上层的灰白色层f白细胞、血小电子天平、离心机、高压锅、PH计、冰箱

4、、移液板等)吸除。枪(0～100微升，0～1000微升)、恒温箱。2-3抗原、阳性血清的配制1-2试剂均用2毫升PI3S溶解。溶解后用0．5毫升EP1．2．1试验试剂管分装，每支100微升，一20℃冻存，随用随取。切忌阿氏液(红细胞保存液)、3．8％柠檬酸钠、PH值反复冻融。7．2的0．01摩尔／升PBS、l％鸡红细胞悬液均自配。2．4微量血凝及血凝抑制试验1．2．2生物制品严格按照禽流感微量红细胞凝集抑制试验操鸡新城疫血凝抑制试验的抗原、阳性血清均产作规程(SN／T1182．2—2004)操作，新城疫抗体检测自哈尔滨维科生物技术开发公司，批号分别为也参照此规程操作。201105

5、、201101；禽流感病毒H5亚型(Re一5株)血3结果凝抑制试验抗原、阳性血清均产自哈尔滨维科生物3．1微量血凝试验今日畜~t．I-医2012．04—381—10日龄。如果经血凝试验表监测发现大部分明新城疫和禽流感鸡只抗体水平较H5亚型(Re一5株)低，而少数抗体血凝抑制试验抗原效价过高f≥9血凝价均为61og2．log2)时，表明鸡则4单位抗原的稀群极可能遭受野释度均为1：64。经4毒的侵袭，必须单位抗原的验证试采取紧急防制措施。对于禽流感首免Et龄，有试验验表明，4、2、1个血凝单位孑L红细胞应出现完全凝表明，1El龄时雏鸡的母源抗体较高，20日龄的母集，0．5个血凝单位孑

6、L红细胞应出现50％凝集。新城源抗体下降到最低水平．母源抗体对抗原有明显的疫和禽流感H5亚型(Re一5株)血凝抑制试验抗原中和作用。另外，雏鸡日龄过小，免疫系统尚未完全血凝价测定准确可靠。建立．对疫苗应答较差，一般建议首免日龄不能小3．2微量血凝抑制试验于10日龄，以1012日龄为佳。血凝抑制(HI)试验结果表明随机抽样的50份4．3由于养殖业对新城疫的重视以及预防免血样新城疫和禽流感H5亚型(Re一5株)抗体效价疫措施的改进新城疫控制的比较好。自上世纪以均≥51og2。新城疫样品平均抗体效价为9．41og2，而来没有大规模的流行。临床上新城疫的发生多以非禽流感H5(Re一5株)

7、平均抗体效价为7．641og2，蛋典型性形式出现，且新城疫常以大肠杆菌、传染性鸡场为免疫合格鸡场，能抵抗新城疫病毒和禽流感支气管炎、法氏囊、禽流感等混合或继发感染，给本H5亚型(Re一5株)病毒的侵入。病的诊断带来困难。禽流感也由于各地普遍采取强4讨论制免疫措施，H5N1亚型禽流感的临床症状逐渐表4．1试验结果表明沂南县该养殖场新城疫和禽现出非典型的特点。疫苗免疫仍是目前防控H5亚流感H5亚型(Re一5株)平均抗体效价分别9．41og2型禽流感有效办法之一。因此必须遵循“预防为主