小檗碱对胰岛β细胞的保护作用及其机制研究.pdf

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1、中国病理生理杂志ChineseJournalofPathophysiology2014，30(12)：2213-2218·2213·[文章编号]1000-4718(2014)12·2213—06小檗碱对胰岛13细胞的保护作用及其机制研究吴惠玲(淄博市第一医院内分泌科，山东淄博255200)[摘要]目的：探讨小檗碱对胰岛细胞的保护作用及可能机制。方法：采用四氧嘧啶(Arm)诱导INS．1胰岛B细胞损伤模型，并以不同浓度的硫酸小檗碱进行干预。将细胞分为对照组(Con组)、损伤组(Axn组)、低剂量小檗碱组(LBer组，小檗碱浓度为15wmol／L)、中剂量小檗碱组(MBer组

2、，小檗碱浓度为45bLmol／L)及高剂量小檗碱组(HBer组，小檗碱浓度为100wmol／L)。流式细胞术观察各组细胞凋亡情况，Westernblotting免疫印迹法分别观察各组PI'EN／PBx／Akt信号通路、HNF．1a／PDX一1信号通路活化情况以及激活型caspase-3的水平；酶联免疫吸附法(ELISA)观察各组基础胰岛素释放及葡萄糖刺激后胰岛素的释放水平。结果：与Con组相比，Axn组凋亡率显著升高，但小檗碱干预后凋亡水平显著降低，且呈浓度依赖性。与Con组相比，Arm组PTEN表达水平明显升高，而PI3K／Akt活性被抑制，激活型caspase-3水平

3、显著升高；而小檗碱处理则能逆转上述FYEN通路的促凋亡作用，且显示出浓度依赖性；与Con组相比，Arm组HNF-1~／PDX一1信号通路活性显著下降，但小檗碱处理则能提高该通路活性，表现出浓度依赖性。与Con组相比，Axn组基础及葡萄糖刺激下胰岛素释放水平均显著降低，而小檗碱处理则能显著恢复上述胰岛素释放水平，呈浓度依赖性。结论：小檗碱对四氧嘧啶损伤的INS．I胰岛B细胞具有保护作用，表现为对其凋亡的抑制与胰岛素分泌功能的恢复，分别与影响细胞内PTEN／PBK／Akt及HNF-1ot,／PDX-1信号通路有关。[关键词]小檗碱；B细胞；细胞凋亡；胰岛素[中图分类号]R36

4、3．2[文献标志码]Adoi：10．3969／j．issn．1000．4718．2014．12．017ProtectiveefectsofberberineinpancreaticisletbetacellsWUHui．1ing(Depa~memofEndocrinology，FirstHospitalofZiboCity，Zibo255200，China．E-mail：ax,elIll~me@sina．corn)[ABSTRACT]AIM：Toexploretheprotectiveeffectsofberberine(Ber)onisletbetacensandrel

5、atedpossiblemechanisms．METHODS：TheinjuryofINS·1ceHswasinducedbytreatmentwithalloxan(Arm)．Bervefinewasthenvenatserialconcentrations．Thecensweredividedintocontrolgroup(Con)，injurygroup(Arm)，low-doseberberinegroup(LBer)，medium-doseberberinegroup(MBer)andhiSh-doseberbefinegroup(HBer)．Flowcyto

6、metrywasem·ployedtodetecttheapoptosis．TheactivationofPrEN／PI3K／AktandHNF-Ia／PDX-1pathwaysandtheproteinlevelofcleavedcaspase一3wereevaluatedbyWesternblotting．Theinsulinreleasesundernormalorhish-glucosestimulationweremeasuredbyELISA．RESULTS：ComparedwithCongroup，theap0ptoticrateincreasedsigni

7、ficantlyinArmgroup．Ber-berinetreatmentreducedtheapoptoticrateinLBergroup，MBergroupandHBergroupinaconcentration-dependentman-ner．ComparedwithCongroup，theproteinlevelsofPTENandcleavedcaspase-3increased，whilePI3Kandphosphoryla-tionofAktdecreasedsignificantlyinArmgroup．