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1、细胞周期素D1蛋白在卵巢上皮性浆液性肿瘤中的表达及其临床意义肿瘤1999年第5期第19卷医疗研究作者：王敏江森王伟李冠群陆景明单位：王敏陆景明中国医科大学第二临床学院妇产科(沈阳110003)；王伟李冠群中国医科大学第二临床学院病理科；江森山东医科大学附属医院妇产科关键词：基因，CyclinDl；卵巢肿瘤细胞周期素Dl(CyclinDI,CD1)是一个G1期细胞进程的细胞周期调节因子(cellcycleregulatoryfactor)□文献报道CD1在多种人类肿瘤中有扩增和过度表达。CD1作为一种新的癌基因，其表达与卵巢肿瘤的关系目前国内、外研究甚少
2、。本研究应用卵白素■生物素过氧化酶复合物(avidin-biotinperoxidasecomplex,ABC)免疫组化法(immnohistochemicalassay,IHCA)对8份正常卵巢组织、47份卵巢上皮性浆液性肿瘤(以下简称浆液性肿瘤)组织中CD1蛋白(CD1P)进行检测，分析其与卵巢浆液性肿瘤的关系。材料和方法一、标本来源收集中国医科大学第一、第二临床医学院1996年4月〜1997年9月手术切除的55份新鲜组织标本，病理冰冻切片厚5um,正常卵巢组织8份，出性浆液性瘤组织10份，交界性浆液性瘤组织4份，浆液性卵巢癌组织33份。浆液性卵巢
3、癌(ovarianserouscarcinoma,OSC)均有完整病理资料，其中I期5例，II期2例，III期22例，IV期4例。病理分级I级8例，II级18例，II［级7例。伴有腹水者17例，伴有癌瘤播散者25例，伴有淋巴结转移者8例。二、抗体与试剂ABC试剂盒购自美国VectorLab,鼠抗人CD1单克隆抗体为美国SantaCruz生物技术公司产品，购自北京中山生物技术有限公司。三、检测方法与步骤冰冻切片用预冷内酮固定5min后进行常规ABC-IHCA染色。CD1抗体的免疫产物用AEC显色，抗体效价为1：10。免疫染色阴性对照采用PBS代替一抗，选
4、择2份乳腺癌已知阳性的冰冻组织片作为CD1阳性对照。四、结果判定及统计学处理按Shimizu等［1］的方法，在高倍光镜下根据细胞内红色反应的肴色范围和程度判定结果。率的比较采用四格表确切概率法。结果一、CD1P的表达CD1的免疫反应产物呈红色细颗粒状，主要位于癌细胞核内，小部分核浆共存。阳性癌细胞多呈灶状分布，少数为散在分布。阳性癌细胞多呈状状分布，少数为散在分布。CD1P在卵巢浆液性癌检出率45.5%高于良性瘤0%及正常卵巢0%(PV0.05),但与交界性瘤25%比较则无统计学意义(P>0.05)o二、CD1P过度表达与OSC生物学特征(%1)CD1
5、P过度表达与OSC临床分期的关系页、IV期卵巢癌CD1P过度表达率50%高于I、II期28.6%,但无显著差异(P>0.05)o(%1)CD1P过度表达与OSC组织学分级的关系I级及I+11级CD1P过度表达率12.5%,34.6%,〜占0〜37.5%,与III级85.7%,〜占100%比较，均有显著性差异(P<0.05),II级与III级间无显著性差异(P>0.05)o(%1)CD1P过度表达与OSC腹水、癌瘤播散和淋巴结转移三项指标的关系尽管CD1P过度表达率在腹水病例为47.1%,在癌瘤播散病例为52.0%,均稍高于相应无腹水43.8%和无播散病
6、例25%,但无统计学差异(P>0.05),而CD1P在淋巴结转移病例过度表达率87.5%明显地高于相应无淋巴结转移病例32%,有显著性差异(P<0.05),旦淋巴结转移病例〜占71.4%,高于相应无淋巴结转移病例〜占50.0%。讨论细胞周期失控是细胞增殖失控而导致癌变的重要原因，CD1P在细胞周期的调控中起关键作用[2]。目前在高等真核细胞中至少有8种哺乳动物细胞周期素基因被鉴定出来(A、B、C、Dl-3、E、H),并且在细胞不同期表现不同的形式[2、3]。其中，与肿瘤关系最密切者为D型周期蛋白[4],而CD1是已被公认的一种新癌基因，已有报道，CD1
7、的异常表达可能与瘤形成及癌进展相关[5]。人类CD1基因位于人类染色体llql3上，全长15kb,编码的CD1P分子晕:约34kDoCD1是一个从G1期至S期转换必需的G1期特异蛋白，其过度表达能明显缩短G1期。乳腺癌、非小细胞肺癌、膀胱癌和食管癌等皆在llql3区域显示扩增的同时，CD1作为此区域亦扩增。然而，CD1过度表达也能够出现在缺乏基因扩增的情况下[6]。默Hql3部位扩增在卵巢癌中尚未见报道，但同时也定位于1lq!3±的成人叶酸盐受体基因已表明在培养的卵巢癌细胞株和原发性卵巢癌中有上升表达[7]。本研究中CD1P在45.5%卵巢浆液性癌中过
8、度表达，在25%交界性浆液性痛中过度表达，正常卵巢及良性瘤中CD1P无表达。癌与良性及正常卵巢
