卵巢上皮性肿瘤组织中Bub1蛋白表达及其临床意义.doc

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1、卵巢上皮性肿瘤组织中Bub1蛋白表达及其临床意义【摘要】目的探讨卵巢上皮性肿瘤组织中Bub1蛋白的表达以及其临床意义。方法对我院2006-2012年病理科保留的117份卵巢组织标本进行免疫组化学方法检测卵巢上皮性肿瘤组织中Bub1蛋白的表达。结果在正常的卵巢组织中，Bub1蛋白的阳性表达率为2353%;在良性肿瘤组织中的阳性表达率为435%;在卵巢癌组织中Bub1蛋白的阳性表达率为9091%;在卵巢交界性组织肿瘤中的阳性表达率为8333%O卵巢癌、卵巢交界性肿瘤组织中Bub1蛋白的阳性表达率均明显高于正常

2、卵巢及卵巢良性肿瘤组织(P<005b结论Bub1蛋白的表达异常是卵巢癌发生的机制之一，与卵巢癌的发生、发展以及转移有关系。【关键词】卵巢上皮性肿瘤；Bub1蛋白；免疫组化作者单位：473000河南省南阳市中心医院妇一科伴随着生物细胞学的快速发展，人们渐渐认识到纺锤体检查点在细胞分裂周期中的重要意义。而在细胞的有丝分裂中，参与纺锤体检查点功能的蛋白有Mad(mitoticarrestdeficient/defective)家族蛋白,包括Mad1、Mad2、Mad3和Bub(buddinguninhibite

3、dbybenzimidazole/benomyl)家族蛋白，包括BubkBub2、Bub3等。Bub1作为纺锤体检测点蛋白，具有通过染色体不稳定性和非整倍体传代促进肿瘤发生的作用［1］。因此，纺锤体的失控是导致肿瘤细胞存在主要原因之一。为此，我院通过对"7份卵巢组织标本进行免疫组化学方法检测卵巢上皮性肿瘤组织中Bub1蛋白的表达，探讨Bub1在临床上的意义。1资料与方法11一般资料我院2006-2012年病理科保留的"7份卵巢标本中，正常卵巢组织21份；卵巢良性肿瘤组织23份；交界性浆液性瘤组织18份；卵

4、巢癌组织55份，其中包括子宫内膜癌6例；粘液性癌16例；移行细胞癌16例；浆液性囊腺癌17例。在本组117份卵巢组织标本中，患有卵巢癌的患者中，有11例患者伴有腹水，有R患者伴淋巴结转移，所有卵巢癌患者在术前均无放疗、化疗史。12方法所有标本通过4%多聚甲醛进行固定，常规石蜡包埋，连续切片4pm。②将石蜡切片进行常规二甲苯脱蜡及梯度酒精脱水。③将玻片擦干净后，滴入3%H2O2,将内源性过氧化物酶进行灭活。柠檬酸盐缓冲液抗原修复30mino④在玻片上滴入15%正常山羊血清工作液恒温封闭10mino⑤第一抗体

5、49过夜。⑥生物素标记第二抗体温室作用下30mine⑦滴入辣根过氧化物酹标记的链霉素卵白素工作液，恒温30mino⑧滴加适量的DAB/H2O2进行反应染色，在显微镜下控制染色深度及背景，在满意后及时用水充分进行冲洗，苏木素复染，二甲苯透明，中性树胶封片。镜下观O13结果判定标准Bub1蛋白的阳性表达主要位于细胞质，部分细胞核着色，染成黄或者棕黄色颗粒。再采用双评分法进行判定。阳性程度判定：在光学显微镜200倍视野下观察卵巢组织标本，在每张切片随机观察5个视野，未见阳性细胞为（一），记作0分；阳性细胞数门0

6、0个细胞＜25%,记作4分；阳性细胞数/100个细胞25%-50%，记作2分；阳性细胞数/100个细胞》50%,记作3分。阳性细胞面积与染色强度积分的相加结果作为判定标准：0分记作不着色;1分记作呈淡黄色；2分记作棕黄色；3分记作棕褐色。将上述两项判定得分做和，0分为阴性；1、2分为弱阳性；3、4分为阳性；5、6分为强阳性。14统计学方法所有数据通过SPSS430软件统计系统进行处理，计量资料用t检验，计数资料用X2检验。2结果Bub1蛋白在不同的病变卵巢组织中的表达率是不同的。在正常的卵巢组织中，Bub

7、1蛋白的阳性表达率为2353%;在良性肿瘤组织中的阳性表达率为435%;在卵巢癌组织中Bub1蛋白的阳性表达率为9091%;在卵巢交界性组织肿瘤中的阳性表达率为8333%o卵巢癌、卵巢交界性肿瘤组织中Bub1蛋白的阳性表达率均明显高于正常卵巢及卵巢良性肿瘤组织（P<005）b具体见表1。3讨论细胞的有丝分裂是一个严格调控、高度有序的周期，为确保有丝分裂过程中的忠实性，通常是通过细胞内的固定检查点来检查完成的。而有丝分裂的检查点又称“纺锤体检查点”，Bub1作为纺锤体检查点的平台蛋白，可能是纺锤体检查点其他

8、组分定位于纺锤体检查点的基础［2］。有研究表明，Bub1可以通过直接作用或者以形成复合物的形式来对其他重要的纺锤体检查点蛋白进行调控，从而影响细胞周期的进程。通过对细胞内BUBI基因表达的研究，在探讨染色体不分离的分子机制具有十分重要的意义［3］。通过本组研究结果表明,Bub1蛋白与卵巢癌的发生有着密切关系，通过实验数据表明，卵巢癌组织中的Bub1的阳性表达率明显高于正常卵巢组织的阳性表达率，且差异具有统计学意义（P<005）