环氧活化偶介质(Epoxy-activatedQZT6FF)产品说明书.doc

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1、环氧活化偶联介质(Epoxy-activatedQZT6FF)产品说明书1.产品简介Epoxy活化偶联介质可用于各种含有氨基、巯基或羟基的亲和配基(蛋白质、多肽、糖等)的偶联,广泛十分广泛。Epoxy-activatedQZT6FF活化偶联介质以自制的琼脂糖凝胶为基质,采用环氧活化的方法活化琼脂糖上的羟基,活化后即可直接用于各种配基的偶联。Epoxy-activatedQZT6FF活化偶联介质具有使用方便、偶联条件温和、偶联效率高和应用范围广(偶联氨基、巯基和羟基)的特点。2.产品特性环氧活化偶

2、联介质的理化性质和产品特性如表1所示。表1环氧活化偶联介质的理化性质和产品特性参数指标基质*6%交联琼脂糖凝胶活化基团环氧基形状球形介质平均粒径90μm(45-165)活化基团密度20-40μmol/mlwetgel偶联条件pH9-13,温度20-40oC,时间5-24h,可以在水相或者有机相中偶联最高流速(25℃)600cm/h推荐流速<150cm/h最高耐压0.3MPa(3bar)保存-20oC(异丙醇)*:除6FF基质外,也可以提供4B、4FF和6B基质的环氧活化介质。3.应用Epoxy活

3、化偶联介质广泛用于各种含有氨基、巯基或羟基的亲和配基(蛋白质、多肽、糖等)的偶联。具体的操作步骤如下(以10ml活化胶偶联BSA为例):清洗:用10-20倍胶体积的去离子水冲洗(大于5次)保存于异丙醇的环氧活化胶,除去异丙醇,抽干,将10ml(约7.5g)加入到30ml的反应器(磨口三角瓶)中,备用。偶联:称取100mgBSA,溶解于15ml0.1M碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(pH10.5),加入到抽干的活化胶中,在摇床上振荡,37℃偶联12-24h;反应完毕后将料液转移到砂芯漏斗中抽干,收集料液用

4、于未偶联BSA的分析和偶联配基密度的计算,偶联配基的微球水洗后抽干。其他配基的偶联方法与BSA类似,但反应条件(pH、温度、时间、配基加入量)需要根据配基的特性和应用的需求进行适当调整。若配基含有游离巯基,可选用0.1M硼砂-硼酸缓冲液,pH8.6,通过巯基进行偶联。(偶联注意事项:偶联氨基可选用pH9-13的缓冲液,偶联巯基可选用pH8.6的缓冲液;避免使用可以和环氧基反应的含氨基的缓冲液,可选用磷酸盐、碳酸盐、硼酸盐和氢氧化钠溶液;pH越高、温度越高,偶联速度越高;时间越长,偶联反应越彻底,

5、但偶联条件的选择还要兼顾配基的稳定性。)封闭:将10ml抽干的偶联BSA的胶加入到100ml三角瓶中,加入30ml1mol/L乙醇胺,pH10.5溶液(或0.1mol/LTris-HCl,pH10.5)。反应温度恒定在37℃,搅拌速度120rpm,反应时间4h。反应停止后将料液转移到砂芯漏斗中抽干,用去离子水清洗。清洗:偶联BSA的介质依次用5倍的去离子水、0.1M含0.5MNaCl的乙酸-乙酸钠缓冲液(pH4.0)、去离子水、0.1M含0.5MNaCl的硼酸-四硼酸钠缓冲液(pH8.0)和去离

6、子水充分洗涤(重复交替清洗3次),抽干,去除未反应的配基。保存:保存于4℃、20%乙醇溶液中。4特色服务(1)提供介质筛选及工艺开发的咨询。(2)接受客户委托开发各种分离介质和分离工艺。(3)按客户要求提供各种规格的预装柱。(4)为客户提供专业的售前和售后服务。

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