番茄黄化突变体叶片蛋白双向电泳技术体系的优化.pdf

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1、第45卷第4期东北农业大学学报45(4)：46-502014年4月JournalofNortheastAgriculturalUniversityApril2014网络出版时间2o14-H4_2113：23：52【URL】http：／／www．cnki．net／kcms／detail／23．1391．S．20140421．1324．020．html番茄黄化突变体叶片蛋白双向电泳技术体系的优化李景富，徐磊L，张贺，许向阳，赵越，齐风坤(1．东北农业大学园艺学院，哈尔滨150030；2．黑龙江省农业科学院大庆分院，黑龙江大庆16

2、1000)摘要：蛋白质提取方法和电泳条件是研究双向电泳的关键。文章初步建立一套适合番茄黄化突变体叶片蛋白双向电．／4c(2一DE)分析的高效提取方法及电泳条件，比较3种蛋白提取方法，筛选最适胶条范围和上样量。结果表明，TCA丙酮法提取的番茄黄化突变体叶片蛋白质含量高、纯度佳、分离效果好；24cmpH4～7IPG胶条适于番茄黄化突变体叶片蛋白分离；1200g为最佳上样量。关键词：番茄黄化突变体；双向电泳；技术体系；优化中图分类号：$641．2文献标志码：A文章编号：1005—9369(2014)04—0046—05李景富，徐磊

3、，张贺，等．番茄黄化突变体叶片蛋白双向电泳技术体系的优化[J】．东北农业大学学报，2014，45(4)：46．50．LiJingfu。XuLei，ZhangHe。eta1．Optimizationontwo-dimensionalelectrophoresistechnologysystemforleavesproteinoftomatoyellowleafmutant[J]．JournalofNo~heastAgriculturalUniversitY,2014，45(4)：46-50．(inChinesewithEngl

4、ishab—stract)Optimizationontwo-dimensionalelectrOphOresistechnologysystemforleavesproteinoftomatoyellowleafmutant／uJingfu，，XULei’一，ZHANGHe’，XUXiangyang’，ZHAOYue’，QIFengkun’(1．SchoolofHorticulture，No~heastAgriculturalUniversity,Harbin150030，China；2．BranchofDaqing，He

5、ilongjiangAcademyofAgriculturalSciences，DaqingHeilongjiang161000，China)Abstract：Themethodofproteinextractionandtheconditionsofelectrophphoresisarethekeyfactorsintwo—dimensionalelectrophoresis(2一DE)research．Theresearchpreliminarilyselectedatechnologysystemwhichwasth

6、ebestforthetwo—dimensionalelectrophoresis(2-DE)analysisontheleaveproteinoftomatoyellowleafmutantthroughcomparingthreediferentmethodsofproteinextractions，variousrangesoftheimmobilizedgradientstrips(IPG)anddiferentproteinquantitiesofsample—loading．Theresultsshowedtha

7、ttheproteinsobtainedfrOmTCA／acetoneprecipitationmethodbywhichtheeficientproteinseparationwerehighincontentandpurlty．24cmpH4—7immobilizedgradientstrips(IPG)wassuitableforleaveproteinseparationoftomatoyellowleafmutantand1200Pgwasexcellentinproteinquantityofsample—loa

8、ding．Keywords：tomatoyellowleafmutant；two—dimensionalelectrophoresis；technologysystem；optimization叶片呈色取决于叶绿素和类胡萝卜素比例，胡萝卜素较叶绿素稳定，致使叶绿素数量少，叶色比值3：1，正